{"id":376227,"date":"2024-03-25T00:01:00","date_gmt":"2024-03-24T23:01:00","guid":{"rendered":"https:\/\/medizinonline.com\/?p=376227"},"modified":"2024-03-12T17:57:36","modified_gmt":"2024-03-12T16:57:36","slug":"desarrollo-de-una-terapia-celular-car-t-para-el-melanoma-uveal-2","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/medizinonline.com\/es\/desarrollo-de-una-terapia-celular-car-t-para-el-melanoma-uveal-2\/","title":{"rendered":"Desarrollo de una terapia celular CAR-T para el melanoma uveal"},"content":{"rendered":"\n

Las c\u00e9lulas T dotadas de especificidad tumoral mediante la expresi\u00f3n de un receptor de ant\u00edgeno <\/em>quim\u00e9rico (CAR) est\u00e1n adquiriendo cada vez m\u00e1s importancia. Ya se utilizan cada vez m\u00e1s en la terapia celular adoptiva en la lucha contra el c\u00e1ncer. La principal ventaja de transferir un CAR frente a transferir un receptor de c\u00e9lulas T <\/em>(TCR) normal es que un CAR puede reconocer el tumor independientemente del CMH.<\/strong><\/p>\n\n\n\n

Las c\u00e9lulas T dotadas de especificidad tumoral mediante la expresi\u00f3n de un receptor de ant\u00edgeno <\/em>quim\u00e9rico (CAR) est\u00e1n adquiriendo cada vez m\u00e1s importancia. Ya se utilizan cada vez m\u00e1s en la terapia celular adoptiva en la lucha contra el c\u00e1ncer. El concepto CAR fue desarrollado originalmente a finales de los a\u00f1os 80 por Zelig Eshhar (Instituto Weizmann de Ciencia, Rehovot, Israel) [1,2]. La mayor\u00eda de los CAR consisten en una construcci\u00f3n scFv derivada de un anticuerpo que se une al ant\u00edgeno tumoral (fragmento variable de cadena \u00fanica,<\/em> que es una prote\u00edna de fusi\u00f3n producida artificialmente que consiste en una parte variable de una cadena ligera y pesada de una inmunoglobulina) y la parte intracelular de la cadena CD3\u03b6, el en do sostenido<\/em> est\u00e1 vinculada a uno o varios dominios costimuladores [3]. Esta estructura en bloque permite la activaci\u00f3n de c\u00e9lulas T espec\u00edficas de ant\u00edgeno en respuesta al reconocimiento espec\u00edfico de ant\u00edgenos en la superficie de c\u00e9lulas malignas, iniciada por la uni\u00f3n de scFv, y la posterior se\u00f1alizaci\u00f3n a trav\u00e9s de la cadena CD3\u03b6 y el dominio coestimulador [3]. La coestimulaci\u00f3n suele producirse a trav\u00e9s del CD28 (superfamilia de inmunoglobulinas) o a trav\u00e9s del 4-1BB (superfamilia de receptores del TNF) [3]. Sin embargo, tambi\u00e9n existen muchos otros formatos. La principal ventaja de transferir un CAR frente a transferir un receptor de c\u00e9lulas T <\/em>(TCR) normal es que un CAR puede reconocer el tumor independientemente del CMH.<\/p>\n\n

Esta tecnolog\u00eda se ha utilizado hasta ahora para desarrollar CAR que se dirigen a diversos ant\u00edgenos de la superficie celular de tumores s\u00f3lidos o hematol\u00f3gicos. Las c\u00e9lulas CAR-T, espec\u00edficas para ant\u00edgenos diana como el CD19 de las c\u00e9lulas B o el ant\u00edgeno de maduraci\u00f3n de c\u00e9lulas B (BCMA) de las c\u00e9lulas plasm\u00e1ticas, provocaron impresionantes regresiones cl\u00ednicas en leucemias, linfomas o mielomas en varios estudios cl\u00ednicos [4\u20136]. Resultados como \u00e9stos condujeron, entre otras cosas la aprobaci\u00f3n de tisagenlecleucel para el tratamiento de la leucemia linfobl\u00e1stica aguda de c\u00e9lulas B (LLA), axicabtagene-ciloleucel para el tratamiento del linfoma no Hodgkin agresivo de c\u00e9lulas B Brexucabtagene-Autoleucel para el tratamiento del linfoma de c\u00e9lulas del manto, Lisocabtagene-Maraleucel para el tratamiento del linfoma de c\u00e9lulas B grandes e Idecabtagene-Vicleucel y Ciltacabtagene-Autoleucel para el tratamiento del mieloma m\u00faltiple por el Administraci\u00f3n de Alimentos y Medicamentos de EE.UU. <\/em>(FDA) y la Agencia Europea de Medicamentos <\/em>(EMA) [3].<\/p>\n\n

Dado que la mayor\u00eda de los ensayos cl\u00ednicos se centran en la eliminaci\u00f3n de tumores hematol\u00f3gicos, el desarrollo de c\u00e9lulas CAR-T contra tumores s\u00f3lidos va a la zaga (visi\u00f3n detallada en [7\u201311]). Si observamos la distribuci\u00f3n geogr\u00e1fica de los ensayos cl\u00ednicos con c\u00e9lulas CAR-T contra tumores s\u00f3lidos registrados en Clinicaltrials.gov (n=352; \u00faltima evaluaci\u00f3n el 13 de julio de 2023), queda claro que la mayor\u00eda de estos ensayos se est\u00e1n llevando a cabo en China (n=199; 55,1%). Estados Unidos ocupa el segundo lugar (n=129; 35,7%). Son muy pocos los estudios realizados en Europa (Alemania n=3, Suiza n=1), Australia y el resto de Asia (combinados n=33; 9,2%) (Tabla 1)<\/strong>.<\/p>\n

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Formatos CAR<\/h3>\n\n

Desde la publicaci\u00f3n del primer concepto de CAR por Zelig Eshhar en 1989 [1,2], los CAR no han dejado de desarrollarse. Esto dio lugar a varias generaciones de CAR basadas en el marco b\u00e1sico del concepto original de CAR. El CAR cl\u00e1sico siempre contiene un scFv basado en un anticuerpo que puede unirse al ant\u00edgeno tumoral. En los CAR de primera generaci\u00f3n (Fig. 1)<\/strong>, la scFv se conecta al dominio de se\u00f1alizaci\u00f3n intracelular de Fc\u03b5RI\u03b3 o CD3\u03b6 a trav\u00e9s de un enlazador flexible y un dominio transmembrana [11,12].<\/p>\n

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La mayor\u00eda de los ensayos cl\u00ednicos registrados con c\u00e9lulas CAR-T contra tumores s\u00f3lidos utilizan un CAR de segunda generaci\u00f3n [11,12], que tambi\u00e9n contiene un dominio costimulador (Fig. 1<\/strong> ). La coestimulaci\u00f3n suele realizarse mediante CD28 o 4-1BB [3]. La coestimulaci\u00f3n con CD28 favorece fisiol\u00f3gicamente la producci\u00f3n de IL-2, -6, -10 y otras interleucinas, as\u00ed como la progresi\u00f3n del ciclo celular, la supervivencia, la diferenciaci\u00f3n y la funci\u00f3n citol\u00edtica de las c\u00e9lulas T [13]. En muchos estudios en los que se utilizaron CAR con un dominio de se\u00f1alizaci\u00f3n CD28, se observaron efectos antitumorales eficaces y r\u00e1pidos. Sin embargo, \u00e9stos s\u00f3lo fueron de corta duraci\u00f3n y se asociaron a una supervivencia limitada in<\/em> vivo en comparaci\u00f3n con los CAR con un dominio de se\u00f1alizaci\u00f3n 4-1BB, por ejemplo [14]. La se\u00f1alizaci\u00f3n 4-1BB fisiol\u00f3gica en las c\u00e9lulas T mejora la progresi\u00f3n del ciclo celular y la proliferaci\u00f3n, la secreci\u00f3n de citocinas, el potencial citol\u00edtico de las c\u00e9lulas T e inhibe la eliminaci\u00f3n clonal y lamuerte celular inducida por activaci\u00f3n (AICD<\/em>) [15,16]. Los CAR que contienen 4-1BB como dominio de se\u00f1alizaci\u00f3n no s\u00f3lo permitieron una activaci\u00f3n celular m\u00e1s robusta y una mayor persistencia in vivo<\/em>, sino que tambi\u00e9n promovieron la diferenciaci\u00f3n de las c\u00e9lulas CAR-T haciac\u00e9lulas de memoria<\/em> central [4,14,17\u201324].<\/p>\n\n

Los CAR de tercera generaci\u00f3n [11,12] contienen combinaciones de dominios costimuladores: CD28\/4-1BB, 4-1BB\/CD28 u OX40\/CD28 (Fig. 1) <\/strong>[25,26]. Los CAR de cuarta generaci\u00f3n son b\u00e1sicamente CAR de segunda generaci\u00f3n con caracter\u00edsticas adicionales. Las TRUCK (c\u00e9lulas T redirigidas para la destrucci\u00f3n universal mediada por citocinas)<\/em> se modifican de tal forma que producen citocinas de forma localizada muy limitada [27]. Los efectos inducidos dependen del tipo de citocinas liberadas: La IL-12, por ejemplo, puede activar una respuesta inmunitaria innata contra el tumor [28], provoca una menor susceptibilidad a los efectos inhibidores de las c\u00e9lulas T reguladoras (Tregs) [29] y aumenta la secreci\u00f3n de citocinas y la proliferaci\u00f3n de c\u00e9lulas T [30,31]. La IL-15, por su parte, aumenta la actividad antitumoral de las c\u00e9lulas CAR-T [32]. <\/p>\n\n

Otra variante de la cuarta generaci\u00f3n es el 4SCART (c\u00e9lulas CAR-T de seguridad). Estas c\u00e9lulas T se transducen simult\u00e1neamente con un CAR y una caspasa 9 inducible (iCASP9) como medida de seguridad frente a acontecimientos adversos. iCASP9 puede inducirse mediante la adici\u00f3n de rapamicina, lo que conduce a la apoptosis de las c\u00e9lulas CAR-T.<\/p>\n\n

Tecnolog\u00edas de transferencia<\/h3>\n\n

Un requisito esencial en la producci\u00f3n de c\u00e9lulas T CAR es encontrar un m\u00e9todo adecuado para transferir el CAR a las c\u00e9lulas T. Para ello se pueden utilizar varios m\u00e9todos existentes. La mayor\u00eda de los ensayos cl\u00ednicos utilizan un m\u00e9todo de transferencia viral (retroviral o lentiviral) para introducir de forma estable el CAR en las c\u00e9lulas T. Durante este proceso, un gen codificador de CAR es transportado desde el virus hasta la c\u00e9lula T, donde se integra de forma estable en el ADN gen\u00f3mico. La progenie de estas c\u00e9lulas transducidas es portadora del gen CAR y puede expresar el receptor en su superficie celular. Las desventajas de la transducci\u00f3n viral son la integraci\u00f3n aleatoria en el genoma de la c\u00e9lula hu\u00e9sped, que puede conducir a la destrucci\u00f3n o activaci\u00f3n de algunos genes (es decir, mutag\u00e9nesis insercional), as\u00ed como la introducci\u00f3n de material\/genes virales. Este m\u00e9todo puede provocar efectos secundarios graves en los pacientes tratados con c\u00e9lulas CAR-T. Lamers et al.<\/em> describieron, por ejemplo, el desarrollo de respuestas inmunitarias al transg\u00e9n que codifica el receptor y al vector retroviral [33]. <\/p>\n\n

Algunos ensayos cl\u00ednicos utilizan un sistema de administraci\u00f3n de genes no viral o un m\u00e9todo de transferencia que integra el gen CAR en un lugar espec\u00edfico (por ejemplo, el sistema de transposones Sleeping Beauty [34\u201337], el sistema de transposones PiggyBac [36,37], CRISPR-Cas9 [38]). La transfecci\u00f3n de ADN o ARN son otros sistemas de transferencia [39], que, sin embargo, no conducen a la integraci\u00f3n de la secuencia codificante del CAR en el genoma de la c\u00e9lula hu\u00e9sped. La expresi\u00f3n transitoria resultante del CAR tiene ciertas ventajas.<\/p>\n\n

C\u00e9lulas CAR-T contra tumores s\u00f3lidos: selecci\u00f3n de ant\u00edgenos y precauciones de seguridad<\/h3>\n\n

Como se ha descrito anteriormente, el uso cl\u00ednico de las c\u00e9lulas CAR-T en el tratamiento de tumores s\u00f3lidos va a la zaga del \u00e9xito de las c\u00e9lulas CAR-T en el tratamiento de tumores hematol\u00f3gicos. Una de las razones es que el CD19 y el BCMA son ant\u00edgenos diana que expresan espec\u00edficamente los linfocitos B o las c\u00e9lulas plasm\u00e1ticas y su eliminaci\u00f3n completa es relativamente inocua. Otros ant\u00edgenos, especialmente en los tumores s\u00f3lidos, suelen expresarse tambi\u00e9n en el tejido sano, lo que dificulta la selecci\u00f3n de un ant\u00edgeno diana adecuado.<\/p>\n\n

Selecci\u00f3n del ant\u00edgeno <\/strong><\/h5>\n\n

Los ant\u00edgenos diana ideales en tumores s\u00f3lidos combinan tres propiedades esenciales: <\/p>\n\n