{"id":376224,"date":"2024-03-25T00:01:00","date_gmt":"2024-03-24T23:01:00","guid":{"rendered":"https:\/\/medizinonline.com\/?p=376224"},"modified":"2024-03-12T14:47:31","modified_gmt":"2024-03-12T13:47:31","slug":"developpement-dune-therapie-a-base-de-cellules-car-t-dans-le-melanome-choroidien-2","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/medizinonline.com\/fr\/developpement-dune-therapie-a-base-de-cellules-car-t-dans-le-melanome-choroidien-2\/","title":{"rendered":"D\u00e9veloppement d’une th\u00e9rapie \u00e0 base de cellules CAR-T dans le m\u00e9lanome choro\u00efdien"},"content":{"rendered":"\n

Les cellules T dot\u00e9es d’une sp\u00e9cificit\u00e9 tumorale gr\u00e2ce \u00e0 l’expression d’un r\u00e9cepteur antig\u00e9nique chim\u00e9rique (chimeric antigen receptor ; <\/em>CAR) prennent de plus en plus d’importance. Elles sont d\u00e9j\u00e0 de plus en plus utilis\u00e9es dans la th\u00e9rapie cellulaire adoptive pour lutter contre le cancer. Le grand avantage du transfert d’un CAR par rapport au transfert d’un r\u00e9cepteur de cellules T normales (T-cell receptor ; <\/em>TCR) est qu’un CAR peut reconna\u00eetre la tumeur ind\u00e9pendamment du CMH.<\/strong><\/p>\n\n\n\n

Les cellules T dot\u00e9es d’une sp\u00e9cificit\u00e9 tumorale gr\u00e2ce \u00e0 l’expression d’un r\u00e9cepteur antig\u00e9nique chim\u00e9rique (chimeric antigen receptor ; <\/em>CAR) prennent de plus en plus d’importance. Elles sont d\u00e9j\u00e0 de plus en plus utilis\u00e9es dans la th\u00e9rapie cellulaire adoptive pour lutter contre le cancer. Le concept CAR a \u00e9t\u00e9 initialement d\u00e9velopp\u00e9 \u00e0 la fin des ann\u00e9es 1980 par Zelig Eshhar (Weizmann Institute of Science, Rehovot, Isra\u00ebl) [1,2]. La plupart des CAR sont constitu\u00e9s d’une construction scFv d\u00e9riv\u00e9e d’anticorps qui se lie \u00e0 l’antig\u00e8ne tumoral. (fragment variable \u00e0 cha\u00eene unique,<\/em> qui est une prot\u00e9ine de fusion artificielle compos\u00e9e d’une partie variable d’une cha\u00eene l\u00e9g\u00e8re et d’une cha\u00eene lourde d’une immunoglobuline) et la partie intracellulaire de la cha\u00eene CD3\u03b6, qui est en do di\u00e8se<\/em> est associ\u00e9 \u00e0 un ou plusieurs domaines costimulatoires [3]. Cette structure modulaire permet l’activation des cellules T sp\u00e9cifiques de l’antig\u00e8ne en r\u00e9ponse \u00e0 la reconnaissance sp\u00e9cifique des antig\u00e8nes \u00e0 la surface des cellules malignes, initi\u00e9e par la liaison du scFv, et la signalisation subs\u00e9quente via la cha\u00eene CD3\u03b6 ainsi que via le domaine costimulateur [3]. La costimulation se fait g\u00e9n\u00e9ralement soit par CD28 (superfamille des immunoglobulines), soit par 4-1BB (superfamille des r\u00e9cepteurs du TNF) [3]. Cependant, il existe de nombreux autres formats. Le grand avantage du transfert d’un CAR par rapport au transfert d’un r\u00e9cepteur de cellules T normales (T-cell receptor ; <\/em>TCR) est qu’un CAR peut reconna\u00eetre la tumeur ind\u00e9pendamment du CMH.<\/p>\n\n

Cette technologie a permis jusqu’\u00e0 pr\u00e9sent de d\u00e9velopper des CARs ciblant diff\u00e9rents antig\u00e8nes de surface cellulaire sur des tumeurs solides ou h\u00e9matologiques. Les cellules CAR-T, sp\u00e9cifiques d’antig\u00e8nes cibles tels que CD19 sur les cellules B ou l’antig\u00e8ne de maturation des cellules B (BCMA) sur les plasmocytes, ont entra\u00een\u00e9 des r\u00e9gressions cliniques impressionnantes dans les leuc\u00e9mies, les lymphomes ou les my\u00e9lomes dans plusieurs \u00e9tudes cliniques [4\u20136]. Des r\u00e9sultats comme ceux-ci ont notamment conduit \u00e0 \u00e0 l’approbation de Tisagenlecleucel pour le traitement de la leuc\u00e9mie aigu\u00eb lymphoblastique \u00e0 cellules B (LAL), d’Axicabtagen-Ciloleucel pour le traitement du lymphome agressif \u00e0 cellules B non hodgkinien, Brexucabtagene-Autoleucel pour le traitement du lymphome \u00e0 cellules du manteau, Lisocabtagene-Maraleucel contre le lymphome \u00e0 grandes cellules B et Idecabtagene-Vicleucel et Ciltacabtagene-Autoleucel pour le traitement du my\u00e9lome multiple par Administration am\u00e9ricaine des denr\u00e9es alimentaires et des m\u00e9dicaments <\/em>(FDA) et la Agence europ\u00e9enne des m\u00e9dicaments <\/em>(EMA) [3].<\/p>\n\n

Comme la plupart des essais cliniques se concentrent sur l’\u00e9limination des tumeurs h\u00e9matologiques, le d\u00e9veloppement des cellules CAR-T contre les tumeurs solides est \u00e0 la tra\u00eene (revue d\u00e9taill\u00e9e sur [7\u201311]). Si l’on consid\u00e8re la r\u00e9partition g\u00e9ographique des essais cliniques sur les cellules CAR-T contre les tumeurs solides enregistr\u00e9s sur Clinicaltrials.gov (n=352 ; derni\u00e8re \u00e9valuation le 13 juillet 2023), il appara\u00eet clairement que la plupart de ces essais sont men\u00e9s en Chine (n=199 ; 55,1%). En deuxi\u00e8me position, on trouve les \u00c9tats-Unis (n=129 ; 35,7%). Tr\u00e8s peu d’\u00e9tudes sont men\u00e9es en Europe (Allemagne n=3, Suisse n=1), en Australie et dans le reste de l’Asie (ensemble n=33 ; 9,2%) (tableau 1).<\/strong><\/p>\n

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Formats CAR<\/h3>\n\n

Depuis la publication du premier concept CAR par Zelig Eshhar en 1989 [1,2], les CAR n’ont cess\u00e9 d’\u00e9voluer. Plusieurs g\u00e9n\u00e9rations de CAR ont ainsi vu le jour, bas\u00e9es sur la structure de base du concept CAR initial. Le CAR classique comprend toujours un scFv \u00e0 base d’anticorps qui peut se lier \u00e0 l’antig\u00e8ne tumoral. Dans les CAR de premi\u00e8re g\u00e9n\u00e9ration (figure 1)<\/strong>, le scFv est li\u00e9 soit au domaine de signalisation intracellulaire de Fc\u03b5RI\u03b3, soit \u00e0 CD3\u03b6, via un lieur flexible et un domaine transmembranaire [11,12].<\/p>\n

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\"\"<\/a><\/figure>\n<\/div>\n

La plupart des \u00e9tudes cliniques enregistr\u00e9es sur les cellules CAR-T contre les tumeurs solides utilisent un CAR de deuxi\u00e8me g\u00e9n\u00e9ration [11,12], qui contient \u00e9galement un domaine de costimulation (Fig. 1).<\/strong> La costimulation est g\u00e9n\u00e9ralement assur\u00e9e par CD28 ou 4-1BB [3]. La costimulation du CD28 soutient physiologiquement la production d’IL-2, -6, -10 et d’autres interleukines, ainsi que la progression du cycle cellulaire, la survie, la diff\u00e9renciation et la fonction cytolytique des lymphocytes T [13]. Dans de nombreuses \u00e9tudes utilisant des CAR avec un domaine de signalisation CD28, des effets antitumoraux efficaces et rapides ont \u00e9t\u00e9 observ\u00e9s. Cependant, ceux-ci \u00e9taient de courte dur\u00e9e et associ\u00e9s \u00e0 une survie limit\u00e9e in vivo<\/em> par rapport, par exemple, aux CARs avec un domaine de signalisation 4-1BB [14]. La signalisation physiologique 4-1BB dans les cellules T augmente la progression et la prolif\u00e9ration du cycle cellulaire, la s\u00e9cr\u00e9tion de cytokines, le potentiel cytolytique des cellules T et inhibe la d\u00e9l\u00e9tion clonale ainsi que la mort cellulaire induite par l’activation (activation-induced cell death, AICD<\/em>) [15,16]. Les CARs contenant 4-1BB comme domaine de signalisation ont non seulement permis une activation cellulaire plus robuste, une persistance accrue in vivo<\/em>, mais ont \u00e9galement favoris\u00e9 la diff\u00e9renciation des cellules CAR-T vers des cellules \u00e0 m\u00e9moire centrale(central memory cells<\/em>) [4,14,17\u201324].<\/p>\n\n

Les CARs de troisi\u00e8me g\u00e9n\u00e9ration [11,12] contiennent des combinaisons de domaines costimulants : CD28\/4-1BB, 4-1BB\/CD28 ou OX40\/CD28 (Fig. 1) <\/strong>[25,26]. Les CAR de quatri\u00e8me g\u00e9n\u00e9ration sont en principe des CAR de deuxi\u00e8me g\u00e9n\u00e9ration avec des caract\u00e9ristiques suppl\u00e9mentaires. Les TRUCK (T cells redirected for universal cytokine-mediated killing)<\/em> sont modifi\u00e9es pour produire des cytokines de mani\u00e8re tr\u00e8s localis\u00e9e [27]. Les effets induits d\u00e9pendent du type de cytokines s\u00e9cr\u00e9t\u00e9es : Par exemple, l’IL-12 peut activer une r\u00e9ponse immunitaire inn\u00e9e contre la tumeur [28], provoque une moindre susceptibilit\u00e9 aux effets inhibiteurs des cellules T r\u00e9gulatrices (Tregs) [29] et augmente la s\u00e9cr\u00e9tion de cytokines et la prolif\u00e9ration des cellules T [30,31]. En revanche, l’IL-15 augmente l’activit\u00e9 antitumorale des cellules CAR-T [32]. <\/p>\n\n

Les cellules 4SCART (cellules T CAR de s\u00e9curit\u00e9) constituent une autre variante de la quatri\u00e8me g\u00e9n\u00e9ration. Ces cellules T sont transduites simultan\u00e9ment avec un CAR et une caspase 9 inductible (iCASP9), par mesure de pr\u00e9caution contre les \u00e9v\u00e9nements ind\u00e9sirables. L’iCASP9 peut \u00eatre induit par l’ajout de rapamycine, ce qui entra\u00eene l’apoptose des cellules CAR-T. Les cellules CAR-T sont alors d\u00e9truites.<\/p>\n\n

Technologies de transfert<\/h3>\n\n

Une n\u00e9cessit\u00e9 essentielle dans la production de cellules CAR-T est de trouver une m\u00e9thode appropri\u00e9e pour transf\u00e9rer le CAR dans les cellules T. Les cellules CAR-T peuvent \u00eatre produites \u00e0 l’aide d’une m\u00e9thode de transfert de cellules CAR. Diff\u00e9rentes m\u00e9thodes existantes peuvent \u00eatre utilis\u00e9es \u00e0 cet effet. La plupart des \u00e9tudes cliniques utilisent une m\u00e9thode de transfert viral (r\u00e9trovirale ou lentivirale) pour introduire le CAR de mani\u00e8re stable dans les cellules T. Les cellules T sont ensuite transf\u00e9r\u00e9es dans le syst\u00e8me immunitaire. Au cours de ce processus, un g\u00e8ne codant pour CAR est transport\u00e9 du virus vers la cellule T, o\u00f9 il est int\u00e9gr\u00e9 de mani\u00e8re stable dans l’ADN g\u00e9nomique. Les descendants de ces cellules transduites portent tous le g\u00e8ne CAR et peuvent exprimer le r\u00e9cepteur \u00e0 la surface de leurs cellules. Les inconv\u00e9nients de la transduction virale sont l’int\u00e9gration arbitraire dans le g\u00e9nome de la cellule h\u00f4te, qui peut entra\u00eener la destruction ou l’activation de certains g\u00e8nes (c’est-\u00e0-dire la mutagen\u00e8se par insertion), et l’introduction de mat\u00e9riel\/g\u00e8nes viraux. Cette m\u00e9thode peut entra\u00eener des effets secondaires graves chez les patients trait\u00e9s avec des CAR-T cells. Lamers et al.<\/em> ont par exemple d\u00e9crit le d\u00e9veloppement de r\u00e9ponses immunitaires au transg\u00e8ne codant pour le r\u00e9cepteur et au vecteur r\u00e9troviral [33]. <\/p>\n\n

Certains essais cliniques utilisent un syst\u00e8me d’administration de g\u00e8nes non viral ou une m\u00e9thode de transfert qui int\u00e8gre le g\u00e8ne CAR \u00e0 un site sp\u00e9cifique (par exemple, le syst\u00e8me Sleeping Beauty Transposon [34\u201337], le syst\u00e8me PiggyBac Transposon [36,37], CRISPR-Cas9 [38]). La transfection d’ADN ou d’ARN sont d’autres syst\u00e8mes de transfert [39], mais ils ne conduisent pas \u00e0 l’int\u00e9gration de la s\u00e9quence codante CAR dans le g\u00e9nome de la cellule h\u00f4te. L’expression transitoire du CAR qui en r\u00e9sulte pr\u00e9sente certains avantages.<\/p>\n\n

CAR-T cells against solid tumors – selection of antigen and safety precautions<\/h3>\n\n

L’utilisation clinique des CAR-T cells est \u00e0 la tra\u00eene dans le traitement des tumeurs solides, comme d\u00e9crit ci-dessus, contrairement au succ\u00e8s des CAR-T cells dans le traitement des tumeurs h\u00e9matologiques. L’une des raisons est que CD19 et BCMA sont des antig\u00e8nes cibles exprim\u00e9s sp\u00e9cifiquement par les cellules B ou les plasmocytes, respectivement, et que leur \u00e9limination compl\u00e8te est relativement inoffensive. D’autres antig\u00e8nes, en particulier sur les tumeurs solides, sont souvent exprim\u00e9s sur les tissus sains, ce qui rend difficile le choix d’un antig\u00e8ne cible appropri\u00e9.<\/p>\n\n

S\u00e9lection de l’antig\u00e8ne <\/strong><\/h5>\n\n

Les antig\u00e8nes cibles id\u00e9aux sur les tumeurs solides combinent trois caract\u00e9ristiques essentielles : <\/p>\n\n