{"id":386527,"date":"2024-10-23T14:00:00","date_gmt":"2024-10-23T12:00:00","guid":{"rendered":"https:\/\/medizinonline.com\/nuove-intuizioni-attraverso-la-multiomica-e-il-sistema-di-reporter-biotecnologico\/"},"modified":"2024-10-23T14:39:07","modified_gmt":"2024-10-23T12:39:07","slug":"nuove-intuizioni-attraverso-la-multiomica-e-il-sistema-di-reporter-biotecnologico","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/medizinonline.com\/it\/nuove-intuizioni-attraverso-la-multiomica-e-il-sistema-di-reporter-biotecnologico\/","title":{"rendered":"Nuove intuizioni attraverso la multiomica e il sistema di reporter biotecnologico"},"content":{"rendered":"\n

I metaboliti nei campioni di siero, urina e feci possono identificare quelli con insufficienza epatica acuta\/cronica tra i pazienti con cirrosi epatica acuta scompensata, come base per misure diagnostiche e terapeutiche precoci.\nQuesta \u00e8 la conclusione di un progetto di studio attuale.\nIn un progetto di un altro team di ricerca, il sistema reporter “EXSISERS” ha fornito interessanti approfondimenti sulla rilevanza dello stato di p53 nella peritonite batterica spontanea, una complicanza infettiva associata alla cirrosi epatica. <\/strong><\/p>\n\n\n\n

La fibrosi epatica avanzata e la cirrosi sono riassunte come “malattia epatica cronica avanzata” (ACLD).\nLa malattia epatica cronica avanzata \u00e8 caratterizzata da un danno persistente e da una crescente cicatrizzazione del fegato.\nLo stadio finale della fibrosi epatica \u00e8 la cirrosi epatica.\nI pazienti con cirrosi con scompenso acuto (AD) hanno un rischio maggiore di sviluppare un’insufficienza epatica acuta-cronica (ACLF).\nL’ACLF \u00e8 caratterizzata da insufficienza extraepatica degli organi e infiammazione sistemica.\nL’ACLF \u00e8 associata a un grave rischio di complicanze infettive e a un’elevata mortalit\u00e0 a breve termine.\nPer migliorare la prognosi dei pazienti colpiti, sono necessarie misure diagnostiche e terapeutiche precoci nella ACLF [1].\nDechaumet et al.\nhanno presentato un progetto di ricerca al congresso EASL di quest’anno, in cui sono state identificate le firme metabolomiche per differenziare i pazienti affetti da AD con o senza ACLF.\n [2,3]Di seguito \u00e8 riportata una sintesi di questo e di un altro progetto di ricerca nel campo delle malattie epatiche avanzate. <\/p>\n\n

Analisi dei dati della coorte MUCOSA-PREDICT <\/h3>\n\n

La totalit\u00e0 delle sostanze a basso peso molecolare (metaboliti) \u00e8 chiamata metaboloma.\nIl metaboloma pu\u00f2 essere misurato, ad esempio, mediante cromatografia, spettrometria di massa o spettroscopia di risonanza magnetica nucleare.\n [10]Il fegato \u00e8 un organo altamente attivo dal punto di vista metabolico e le malattie del fegato sono sempre pi\u00f9 studiate con metodi multi-omici (Fig. 1)<\/strong>.\nMoreau et al.\nhanno riferito nel 2020 nel Journal of Hepatology di essere riusciti a identificare un’impronta digitale specifica dell’ACLF di 38 metaboliti nel sangue, utilizzando un approccio multiomico in campioni di tessuto, che si correla con l’infiammazione sistemica e agisce come indicatore della disfunzione mitocondriale negli organi periferici [4]. <\/p>\n

\n
\"\"<\/a><\/figure>\n<\/div>\n

Obiettivi e metodologia dello studio: <\/strong>il progetto di Dechaumet et al.\nmirava a,\n(i) indagare se l’analisi dei metaboliti nei campioni di urina e di feci abbia un valore aggiunto per la caratterizzazione del metaboloma nei pazienti cirrotici scompensati e\n(ii) valutare come la metabolomica multi-matrice contribuisca a migliorare la stratificazione dei pazienti con cirrosi scompensata [2].\nA tal fine, i ricercatori hanno analizzato campioni di siero, urina e feci della coorte MUCOSA-PREDICT, in cui sono seguiti 93 pazienti cirrotici con scompenso acuto, utilizzando la cromatografia liquida accoppiata alla spettrometria di massa ad alta risoluzione.\nSono stati rilevati e identificati un totale di 402 metaboliti nelle tre matrici biologiche. <\/p>\n\n

Risultati: <\/strong>Il maggior numero di metaboliti le cui concentrazioni sono influenzate dall’ACLF \u00e8 stato osservato nei campioni di siero [2].\n\u00c8 interessante notare che anche le concentrazioni di alcuni metaboliti nelle urine e nelle feci, non rilevate nel siero, sono state influenzate dall’ACLF.\nTuttavia, le analisi della curva ROC eseguite per le firme metabolomiche in matrici singole o combinate hanno mostrato che la firma del siero \u00e8 la migliore nel discriminare tra AD e ACLF.\nSi tratta di una scoperta clinicamente rilevante, poich\u00e9 entrambe le malattie si sovrappongono nei singoli casi, ma sono entit\u00e0 diverse in termini di fisiopatologia e terapia. <\/p>\n\n

Implementazione del sistema di reporting “EXSISERS”.<\/h3>\n\n

L’asse intestino-fegato descrive le diverse interazioni tra l’intestino e il fegato, compreso lo scambio di componenti cellulari e molecolari, ed \u00e8 di importanza centrale per la regolazione di processi (pato)fisiologici essenziali.\nI pazienti con cirrosi epatica hanno uno spessore mucoso ridotto, che facilita il contatto diretto dei batteri con le cellule epiteliali e la degradazione dei composti cellulari [5].\nLa traslocazione batterica \u00e8 considerata una fase cruciale nella patogenesi delle infezioni batteriche [6].\nAd esempio, la traslocazione dei batteri intestinali nei linfonodi mesenterici \u00e8 un evento chiave nella peritonite batterica spontanea.\nLa peritonite batterica spontanea** \u00e8 un’infiammazione del liquido ascitico che si verifica con particolare frequenza nella cirrosi epatica e pu\u00f2 avere conseguenze gravi. <\/p>\n\n

[11]** I batteri pi\u00f9 comuni che causano la peritonite batterica spontanea sono l’Escherichia coli Gram-negativo e la Klebsiella pneumoniae e lo Streptococcus pneumoniae Gram-positivo.<\/em><\/p>\n\n

Obiettivi e metodologia dello studio: <\/strong>secondo Ernst et al.\nlo stress cellulare innescato dal contatto diretto con i batteri influisce sulla famiglia di fattori di trascrizione p53, che agiscono come regolatori chiave del ciclo cellulare, dei meccanismi di riparazione e della morte cellulare (apoptosi) [3].\nNella sua forma wild-type, la p53 (wtp53) agisce come soppressore tumorale centrale [7].\nLe proteine omologhe dal punto di vista strutturale e funzionale, p63 e p73, sono incluse nella famiglia di fattori di trascrizione p53.\nLa funzione di p53 \u00e8 alterata in un gran numero di tumori (mutazioni TP53).\nNel loro studio, Ernst et al.\nhanno studiato gli effetti dei batteri dell’ascite sull’espressione delle isoforme p53$<\/sup> in relazione all’induzione della morte cellulare nelle cellule epiteliali.\nHanno applicato un nuovo sistema reporter biotecnologico [3].\nIl sistema reporter chiamato EXSISERS pu\u00f2 tracciare l’espressione delle isoforme nel tempo nelle cellule viventi [8]. <\/p>\n\n

Le<\/sup> isoforme sono varianti di proteine che derivano da un singolo gene.<\/em><\/p>\n\n

Tre sistemi reporter di luciferasi intein specifici per l’esone (EXSISERS) sono stati integrati negli esoni 2, 4 e 7 del gene TP53.\nLe inteine scisse consentono la scissione dell’enzima luciferasi dal polipeptide p53, mantenendo l’integrit\u00e0 strutturale delle isoforme p53 [9].\nQuesto metodo pu\u00f2 essere utilizzato per quantificare con precisione i rapporti delle isoforme della proteina p53 a livello cellulare.\nLe cellule HCT116-EXISERS sono state co-coltivate con Escherichia coli <\/em>derivate dal paziente e sono stati misurati i tre gruppi principali di isoforme p53 – p53 induzione dell’arresto del ciclo cellulare a lunghezza piena, \u039440p53 induzione della morte cellulare, \u0394133p53\/\u0394160p53 pro-proliferativo.\nAllo stesso tempo, \u00e8 stata quantificata la morte cellulare indotta dai batteri nelle cellule HCT116 p53 wild-type e p53 knockout.\nPer determinare il tipo di morte cellulare \u00e8 stata utilizzata la microscopia elettronica. <\/p>\n\n

Risultati: <\/strong>La co-coltivazione di batteri derivati da pazienti con cellule HCT116-EXISERS ha portato inizialmente ad un aumento della produzione dell’isoforma p53 che induce la morte cellulare, \u039440p53, entro 15 minuti [3].\nQuesto \u00e8 stato seguito da una diminuzione delle isoforme p53 proliferative \u0394133p53\/\u0394160p53.\nAllo stesso tempo, \u00e8 stata osservata l’apoptosi in risposta al contatto batterico, che ha mostrato le caratteristiche morfologiche della paraptosi, compreso il rigonfiamento mitocondriale e la vacuolizzazione citoplasmatica.\nParallelamente ai cambiamenti morfologici osservati, la citometria a flusso ha confermato il danno mitocondriale e della membrana plasmatica.\nIl noto inibitore della paraptosi, l’acinomicina D, ha bloccato efficacemente la morte cellulare indotta dai batteri.\nIn accordo con l’induzione misurata dell’isoforma \u039440p53, l’induzione della morte cellulare \u00e8 stata significativamente ritardata da un knockout p53 mediato da CRISPR\/Cas9. <\/p>\n\n

Sommario<\/strong><\/td><\/tr>
Nella cirrosi epatica con scompenso acuto (AD), il rischio di sviluppare un’insufficienza epatica acuta-cronica (ACLF) \u00e8 aumentato.\nNello studio di Dechaumet et al.\nha dimostrato che le firme metaboliche del sangue, ma anche dell’urina e delle feci, differenziano i pazienti con AD con e senza ACLF.\nI dati ottenuti dal compartimento ematico sembrano fornire le migliori prestazioni di stratificazione. <\/td><\/tr>
Nei pazienti con cirrosi epatica, la traslocazione batterica avviene a causa dell’integrit\u00e0 epiteliale compromessa.\nLe risposte cellulari allo stress batterico sono regolate da specifiche isoforme di p53.\nLo studio di Ernst et al.\ndimostra che lo stato di p53 esercita un’influenza decisiva sulla suscettibilit\u00e0 alla paraptosi.\nL’induzione o la stabilizzazione mirata di specifiche isoforme di p53 potrebbe quindi rappresentare un’opzione terapeutica per il trattamento della peritonite batterica spontanea. <\/td><\/tr>
a [2,3]<\/em><\/td><\/tr><\/tbody><\/table><\/figure>\n\n

Congresso: Congresso EASL 2024<\/em><\/p>\n\n

Letteratura:<\/p>\n\n

    \n
  1. H\u00fcbener P, Braun G, Fuhrmann V: Med Klin Intensivmed Notfmed 2018; 113(8): 649-657.<\/li>\n\n\n\n
  2. Dechaumet S, et al: La metabolomica multicompartimentale per stratificare i pazienti cirrotici con scompenso acuto, WED-083, Congresso EASL, Milano, 5-8 giugno 2024.<\/li>\n\n\n\n
  3. Ernst M, et al: Cirrosi epatica e danno epiteliale – L’asse intestino-fegato nella peritonite batterica spontanea e la sua modulazione da parte di p53, WED-106, Congresso EASL, Milano, 5-8 giugno 2024.<\/li>\n\n\n\n
  4. Moreau R, et al: J Hepatol 2020; 72: 688-701.<\/li>\n\n\n\n
  5. Haderer, M. et al: Gut 2022; 71: 580-592. <\/li>\n\n\n\n
  6. Rayes N: Indagine sperimentale e clinica sull’influenza dei pre e probiotici sulla traslocazione batterica e sulle infezioni post-operatorie dopo la chirurgia addominale, tesi di abilitazione, 2004, https:\/\/core.ac.uk,<\/a>(ultimo accesso 27\/08\/2024) <\/li>\n\n\n\n
  7. Weilbacher A: Il ruolo dello stato di p53 per la sensibilit\u00e0 dei tumori ai diversi attivatori di p53, Dissertazione, 2017, https:\/\/elib.uni-stuttgart.de,<\/a>(ultimo accesso 27.08.2024).<\/li>\n\n\n\n
  8. “Nuove proteine di design rendono visibili le isoforme in modo non invasivo”, Helmholtz Monaco, 04.06.2021. <\/li>\n\n\n\n
  9. Truong, D-JJ, et al: Interrogazione non invasiva e ad alto rendimento dell’espressione di isoforme specifiche di un esone. Nature Cell Biology 2021, doi:10.1038\/s41556-021-00678-x<\/li>\n\n\n\n
  10. Raja G, et al.: Recent Advances of Microbiome-Associated Metabolomics Profiling in Liver Disease: Principles, Mechanisms, and Applications. International Journal of Molecular Sciences 2021; 22(3): 1160. www.mdpi.com\/1422-0067\/22\/3\/1160#<\/a>, (letzter Abruf 27.08.2024)\u00a0<\/li>\n\n\n\n
  11. “Peritonite batterica spontanea (SBP)”, Danielle Tholey, MD, www.msdmanuals.com\/de,<\/a>(ultimo accesso 27\/08\/2024) .<\/a><\/li>\n<\/ol>\n\n

    <\/p>\n\n

    HAUSARZT PRAXIS 2024; 19(9): 38-39 (pubblicato il 18.9.24, prima della stampa)<\/em><\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"

    I metaboliti nei campioni di siero, urina e feci possono identificare quelli con insufficienza epatica acuta\/cronica tra i pazienti con cirrosi epatica acuta scompensata, come base per misure diagnostiche e…<\/p>\n","protected":false},"author":7,"featured_media":386530,"comment_status":"closed","ping_status":"closed","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"_acf_changed":false,"pmpro_default_level":"","cat_1_feature_home_top":false,"cat_2_editor_pick":false,"csco_eyebrow_text":"Cirrosi epatica ","footnotes":""},"category":[11550,11522,11515],"tags":[15593,78624,78621,78623,78622,78619,78620],"powerkit_post_featured":[],"class_list":["post-386527","post","type-post","status-publish","format-standard","has-post-thumbnail","category-rx-it","category-rapporti-del-congresso","category-studi","tag-cirrosi-epatica","tag-congresso-easl-2024","tag-esordienti","tag-insufficienza-epatica-acuta-cronica","tag-multiomica-it","tag-sistema-reporter-biotecnologico-it","tag-stato-di-p53","pmpro-has-access"],"acf":[],"publishpress_future_action":{"enabled":false,"date":"2026-06-27 02:46:34","action":"change-status","newStatus":"draft","terms":[],"taxonomy":"category","extraData":[]},"publishpress_future_workflow_manual_trigger":{"enabledWorkflows":[]},"wpml_current_locale":"it_IT","wpml_translations":{"pt_PT":{"locale":"pt_PT","id":386521,"slug":"novos-conhecimentos-atraves-da-multi-omica-e-do-sistema-reporter-biotecnologico","post_title":"Novos conhecimentos atrav\u00e9s da multi-\u00f3mica e do sistema rep\u00f3rter biotecnol\u00f3gico","href":"https:\/\/medizinonline.com\/pt-pt\/novos-conhecimentos-atraves-da-multi-omica-e-do-sistema-reporter-biotecnologico\/"},"es_ES":{"locale":"es_ES","id":386514,"slug":"nuevos-conocimientos-a-traves-de-la-multiomica-y-el-sistema-reportero-biotecnologico","post_title":"Nuevos conocimientos a trav\u00e9s de la multi\u00f3mica y el sistema reportero biotecnol\u00f3gico","href":"https:\/\/medizinonline.com\/es\/nuevos-conocimientos-a-traves-de-la-multiomica-y-el-sistema-reportero-biotecnologico\/"}},"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/medizinonline.com\/it\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/386527","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/medizinonline.com\/it\/wp-json\/wp\/v2\/posts"}],"about":[{"href":"https:\/\/medizinonline.com\/it\/wp-json\/wp\/v2\/types\/post"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/medizinonline.com\/it\/wp-json\/wp\/v2\/users\/7"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/medizinonline.com\/it\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=386527"}],"version-history":[{"count":3,"href":"https:\/\/medizinonline.com\/it\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/386527\/revisions"}],"predecessor-version":[{"id":388735,"href":"https:\/\/medizinonline.com\/it\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/386527\/revisions\/388735"}],"wp:featuredmedia":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/medizinonline.com\/it\/wp-json\/wp\/v2\/media\/386530"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/medizinonline.com\/it\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=386527"}],"wp:term":[{"taxonomy":"category","embeddable":true,"href":"https:\/\/medizinonline.com\/it\/wp-json\/wp\/v2\/category?post=386527"},{"taxonomy":"post_tag","embeddable":true,"href":"https:\/\/medizinonline.com\/it\/wp-json\/wp\/v2\/tags?post=386527"},{"taxonomy":"powerkit_post_featured","embeddable":true,"href":"https:\/\/medizinonline.com\/it\/wp-json\/wp\/v2\/powerkit_post_featured?post=386527"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}