{"id":325598,"date":"2022-06-14T01:00:00","date_gmt":"2022-06-13T23:00:00","guid":{"rendered":"https:\/\/medizinonline.com\/caracterizacao-de-alta-resolucao-das-celulas-do-liquido-cefalorraquidiano\/"},"modified":"2023-01-12T14:01:55","modified_gmt":"2023-01-12T13:01:55","slug":"caracterizacao-de-alta-resolucao-das-celulas-do-liquido-cefalorraquidiano","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/medizinonline.com\/pt-pt\/caracterizacao-de-alta-resolucao-das-celulas-do-liquido-cefalorraquidiano\/","title":{"rendered":"Caracteriza\u00e7\u00e3o de alta resolu\u00e7\u00e3o das c\u00e9lulas do l\u00edquido cefalorraquidiano"},"content":{"rendered":"\n

A realiza\u00e7\u00e3o de citometria de fluxo a partir de amostras de LCR de alta qualidade permitiu a identifica\u00e7\u00e3o de assinaturas espec\u00edficas de c\u00e9lulas imunit\u00e1rias em diferentes doen\u00e7as neurol\u00f3gicas. Desta forma, a diferencia\u00e7\u00e3o de v\u00e1rias doen\u00e7as neurol\u00f3gicas, por exemplo, neuropatias imunit\u00e1rias e doen\u00e7as auto-imunes do sistema nervoso central, poderia ser melhorada e o conhecimento adquirido sobre as poss\u00edveis popula\u00e7\u00f5es celulares envolvidas nas diferentes doen\u00e7as.<\/strong><\/p>\n\n\n\n

No Departamento de Neurologia com o Instituto de Neurologia Translacional do Hospital Universit\u00e1rio de M\u00fcnster, a citometria de fluxo a partir de amostras de LCR de alta qualidade foi realizada a uma escala anteriormente inating\u00edvel e foi estabelecida uma base de dados \u00fanica e abrangente que permitiu a identifica\u00e7\u00e3o de assinaturas espec\u00edficas de c\u00e9lulas imunit\u00e1rias em diferentes doen\u00e7as neurol\u00f3gicas. Isto melhorou a diferencia\u00e7\u00e3o de v\u00e1rias doen\u00e7as neurol\u00f3gicas, por exemplo, neuropatias imunit\u00e1rias e doen\u00e7as auto-imunes do sistema nervoso central, e forneceu uma vis\u00e3o das poss\u00edveis popula\u00e7\u00f5es celulares envolvidas nas diferentes doen\u00e7as. O artigo seguinte permite uma vis\u00e3o geral do trabalho cient\u00edfico baseado na citometria de fluxo do l\u00edquido cefalorraquidiano e d\u00e1 uma breve vis\u00e3o geral de certas composi\u00e7\u00f5es de c\u00e9lulas imunit\u00e1rias em doen\u00e7as neurol\u00f3gicas importantes.<\/p>\n\n

O LCR como janela de diagn\u00f3stico para o sistema nervoso central<\/h2>\n\n

O l\u00edquido cefalorraquidiano (LCR para abreviar) \u00e9 um l\u00edquido claro que circula \u00e0 volta do sistema nervoso central (SNC) e envolve o c\u00e9rebro e a medula espinal. Neste contexto, o LCR n\u00e3o s\u00f3 fornece protec\u00e7\u00e3o mec\u00e2nica, mas tamb\u00e9m provavelmente fornece nutrientes \u00e0s c\u00e9lulas do sistema nervoso central [1], serve como meio de transporte para as c\u00e9lulas imunit\u00e1rias [2] e medeia o transporte de antig\u00e9nios entre o SNC e os compartimentos perif\u00e9ricos, tais como o sangue [3]. A frac\u00e7\u00e3o n\u00e3o celular do LCR \u00e9 produzida como um ultrafiltrado do soro no plexo cor\u00f3ide nos ventr\u00edculos cerebrais, em que os solutos passam do soro para o LCR, dependendo do seu tamanho. A drenagem do LCR (reabsor\u00e7\u00e3o na circula\u00e7\u00e3o) tem lugar atrav\u00e9s dos sistemas venoso e linf\u00e1tico [3,4]. As c\u00e9lulas do LCR s\u00e3o leuc\u00f3citos, que s\u00e3o chamados leuc\u00f3citos do LCR ou c\u00e9lulas do LCR. A concentra\u00e7\u00e3o de c\u00e9lulas no QCA \u00e9 cerca de mil vezes inferior \u00e0 do sangue perif\u00e9rico. Em condi\u00e7\u00f5es fisiol\u00f3gicas, o CSF cont\u00e9m \u22644 CSF leuc\u00f3citos\/\u00b5l (ou <5\/liquor-leuc\u00f3citos\/\u00b5l). O perfil celular no LCR \u00e9 linfoc\u00edtico e monoc\u00edtico e caracteriza-se por uma domin\u00e2ncia de linf\u00f3citos CD4+ T. Em compara\u00e7\u00e3o com o sangue perif\u00e9rico, os linf\u00f3citos de mem\u00f3ria e linf\u00f3citos T reguladores e as c\u00e9lulas assassinas naturais (NK) s\u00e3o aumentados no LCR, enquanto os linf\u00f3citos B s\u00e3o reduzidos e os plasm\u00f3citos n\u00e3o est\u00e3o presentes em condi\u00e7\u00f5es fisiol\u00f3gicas [5,6]. Isto sugere que a composi\u00e7\u00e3o celular do QCA forma o seu pr\u00f3prio compartimento, que est\u00e1 sujeito a regula\u00e7\u00e3o e controlo rigorosos e deve ser regulado independentemente do sangue perif\u00e9rico. Uma vez que o LCR rodeia o sistema nervoso central, \u00e9 o compartimento mais pr\u00f3ximo do SNC que \u00e9 acess\u00edvel na pr\u00e1tica cl\u00ednica para a an\u00e1lise diagn\u00f3stica por pun\u00e7\u00e3o lombar. \u00c9 bem conhecido que o LCR pode fornecer informa\u00e7\u00f5es sobre os mecanismos celulares das doen\u00e7as do SNC. A imunofenotipagem de c\u00e9lulas do LCR – como apresentamos neste artigo – pode ajudar a obter novos conhecimentos sobre a fisiopatologia, tornar as an\u00e1lises de diagn\u00f3stico mais precisas e avaliar melhor os progn\u00f3sticos individuais. No futuro, isto poder\u00e1 ajudar a desenvolver novas abordagens terap\u00eauticas para v\u00e1rias doen\u00e7as do sistema nervoso [7,8].<\/p>\n\n

Citometria de fluxo de c\u00e9lulas do LCR numa escala sem precedentes<\/h2>\n\n

A citometria de fluxo \u00e9 um m\u00e9todo para a detec\u00e7\u00e3o quantitativa e caracteriza\u00e7\u00e3o molecular de c\u00e9lulas. Orientado para as propriedades celulares, este procedimento permite a classifica\u00e7\u00e3o em diferentes classes celulares (por exemplo, linf\u00f3citos, mon\u00f3citos). Na citometria de fluxo, as c\u00e9lulas de uma suspens\u00e3o s\u00e3o registadas num chamado cit\u00f3metro de fluxo. Cada c\u00e9lula individual passa por um raio laser, de cujo “perfil de resposta” \u00e9 poss\u00edvel a detec\u00e7\u00e3o do tamanho da c\u00e9lula, da granularidade da c\u00e9lula e da express\u00e3o dos marcadores celulares de cada c\u00e9lula individual. As combina\u00e7\u00f5es espec\u00edficas de marcadores determinam que popula\u00e7\u00e3o celular est\u00e1 envolvida (Tab. 1) <\/span>[5,14].<\/p>\n\n

\"\"<\/figure>\n\n

No laborat\u00f3rio do CSF do Departamento de Neurologia com o Instituto de Neurologia Translacional do Hospital Universit\u00e1rio de M\u00fcnster, foram realizados nos \u00faltimos anos exames citom\u00e9tricos de fluxo muito extensos a partir de sangue e, em particular, tamb\u00e9m de amostras de alta qualidade de LCR de pacientes com v\u00e1rias doen\u00e7as neurol\u00f3gicas. Todos os anos, cerca de mil amostras de QCA foram analisadas utilizando citometria de fluxo normalizada e os conjuntos de dados foram recolhidos num biobanco. Estes dados atingiram assim uma escala sem precedentes e est\u00e3o dispon\u00edveis para numerosas redes de investiga\u00e7\u00e3o tanto a n\u00edvel nacional como internacional.<\/p>\n\n

No primeiro trabalho cient\u00edfico resultante, as c\u00e9lulas imunit\u00e1rias foram comparadas no l\u00edquido cefalorraquidiano e no sangue de doentes com doen\u00e7as auto-imunes do sistema nervoso central e perif\u00e9rico [5,9]. A an\u00e1lise citom\u00e9trica de fluxo tamb\u00e9m tem sido utilizada em doentes com doen\u00e7as neurodegenerativas como a dem\u00eancia de Alzheimer e a dem\u00eancia frontotemporal [7,10]. Em coopera\u00e7\u00e3o com o Departamento de Psiquiatria do Hospital Universit\u00e1rio de M\u00fcnster, os leuc\u00f3citos de amostras de sangue e l\u00edquido cefalorraquidiano de doentes com perturba\u00e7\u00f5es psic\u00f3ticas prim\u00e1rias foram examinados e comparados com os perfis imunol\u00f3gicos de doen\u00e7as neurol\u00f3gicas.<\/p>\n\n

A base de dados do Departamento de Neurologia com o Instituto de Neurologia Translacional do Hospital Universit\u00e1rio de M\u00fcnster continuar\u00e1 a ser expandida com novos conjuntos de dados no futuro e servir\u00e1 como fonte de informa\u00e7\u00e3o para an\u00e1lises mais profundas e diagn\u00f3sticos diferenciais especificados de v\u00e1rias doen\u00e7as.<\/p>\n\n

Neuropathies<\/h2>\n\n

As neuropatias – doen\u00e7as do sistema nervoso perif\u00e9rico – s\u00e3o muito comuns e podem afectar as fibras nervosas motoras, sensoriais e auton\u00f3micas. Clinicamente, as neuropatias s\u00e3o diferenciadas em fun\u00e7\u00e3o do seu padr\u00e3o de distribui\u00e7\u00e3o, curso cl\u00ednico e g\u00e9nese. Dependendo da localiza\u00e7\u00e3o dos nervos afectados, \u00e9 feita uma distin\u00e7\u00e3o entre mononeuropatias e polineuropatias (PNP). Existe um vasto espectro de causas poss\u00edveis de neuropatias, incluindo doen\u00e7as metab\u00f3licas, t\u00f3xicas, heredit\u00e1rias, infecciosas, auto-imunes, vascul\u00edticas, paraprote\u00e9micas e malignas. A causa mais comum de polineuropatia no mundo ocidental \u00e9 a diabetes mellitus, seguida da g\u00e9nese etilot\u00f3xica. At\u00e9 10% das neuropatias s\u00e3o causadas por processos auto-imunes e s\u00e3o, portanto, tamb\u00e9m referidas como neuropatias imunit\u00e1rias [11].<\/p>\n\n

O diagn\u00f3stico \u00e9 baseado principalmente na anamnese, bem como no exame f\u00edsico e neurol\u00f3gico. \u00c9 dada especial aten\u00e7\u00e3o a infec\u00e7\u00f5es anteriores, por exemplo, gastroenterite e infec\u00e7\u00f5es do tracto respirat\u00f3rio superior, doen\u00e7as pr\u00e9-existentes e sintomas de outros sistemas org\u00e2nicos, por exemplo, sintomas auton\u00f3micos. O primeiro teste laboratorial \u00e9 um teste de diagn\u00f3stico padr\u00e3o. Com a ajuda do diagn\u00f3stico alargado de certos anticorpos ganglios\u00eddeos (GM1, GM2, GQ1b, etc.), o diagn\u00f3stico de uma neuropatia imunit\u00e1ria auto-imune mediada pode ser apoiado em caso de suspeita cl\u00ednica. Par\u00e2metros inflamat\u00f3rios, imunoelectroforese, anticorpos reum\u00e1ticos (ANA, AN-CA) ou anticorpos antineuronais (anti-Hu, anti-CV2\/CRMP5, anti-amfisina, anti-Ma2) podem ser indicativos de doen\u00e7a sist\u00e9mica ou maligna como causa de polineuropatias inflamat\u00f3rias. Para excluir infec\u00e7\u00f5es virais ou bacterianas, pode ser acrescentado um historial m\u00e9dico abrangente e um diagn\u00f3stico serol\u00f3gico de patog\u00e9nios virais (EBV, CMV, HSV, VZV, FSME, HBV, VIH, poliomielite) ou bacterianos (Borrelia, Treponema pallidum). As medi\u00e7\u00f5es electrofisiol\u00f3gicas podem detectar com maior precis\u00e3o os padr\u00f5es de distribui\u00e7\u00e3o e de danos e permitir a classifica\u00e7\u00e3o em diferentes subtipos. A electromiografia pode ser utilizada para detectar outros padr\u00f5es de danos miog\u00e9nicos, tais como denerva\u00e7\u00e3o, atrofia muscular e actividade espont\u00e2nea. T\u00e9cnicas de imagem como a sonografia e a resson\u00e2ncia magn\u00e9tica podem visualizar padr\u00f5es de danos e ajudar no diagn\u00f3stico de exclus\u00e3o de outras causas de neuropatias, por exemplo, tumores neuronais como os schwannomas.<\/p>\n\n

Neuropatias imunes<\/h2>\n\n

As neuropatias imunes s\u00e3o particularmente relevantes porque podem ser tratadas se diagnosticadas precocemente e a terapia for iniciada adequadamente. Principalmente, as neuropatias imunit\u00e1rias s\u00e3o divididas num tipo de curso agudo (\u2264four semanas), subagudo (quatro a oito) ou cr\u00f3nico (\u2265eight semanas). A polineuropatia inflamat\u00f3ria desmielinizante aguda (AIDP) \u00e9 chamada s\u00edndrome de Guillain-Barr\u00e9 (GBS) e \u00e9 a forma mais comum de neuropatias imunit\u00e1rias agudas, enquanto a polineuropatia inflamat\u00f3ria desmielinizante cr\u00f3nica (CIDP) \u00e9 o prot\u00f3tipo de neuropatias imunit\u00e1rias cr\u00f3nicas. O diagn\u00f3stico diferencial de polineuropatias inflamat\u00f3rias \u00e9 ainda hoje um grande desafio. Para al\u00e9m das neuropatias auto-imunes, v\u00e1rias outras causas devem ser consideradas para o diagn\u00f3stico diferencial (Fig. 1)<\/span>.<\/p>\n\n

\"\"<\/figure>\n\n

Diferencia\u00e7\u00e3o de neuropatias imunit\u00e1rias utilizando perfis de c\u00e9lulas imunit\u00e1rias<\/h2>\n\n

A classifica\u00e7\u00e3o em neuropatias imunit\u00e1rias agudas e cr\u00f3nicas \u00e9 parcialmente artificial e existem muitas sobreposi\u00e7\u00f5es e transi\u00e7\u00f5es fluidas entre as duas formas. Assim, o CIDP mostra um in\u00edcio agudo do tipo GBS em at\u00e9 10% dos casos. Em contrapartida, foi descrito um curso subagudo de mais de quatro semanas em casos inicialmente classificados como GBS [12]. At\u00e9 agora, n\u00e3o existem par\u00e2metros progn\u00f3sticos que permitam a previs\u00e3o de um curso agudo vs. cr\u00f3nico no momento da primeira manifesta\u00e7\u00e3o cl\u00ednica. Como as op\u00e7\u00f5es terap\u00eauticas e a resposta a diferentes terapias imunomoduladoras diferem em GBS e CIDP, a diferencia\u00e7\u00e3o precoce das entidades \u00e9 importante e pode ter um impacto positivo no curso e no progn\u00f3stico das doen\u00e7as.<\/p>\n\n

Nas medi\u00e7\u00f5es padr\u00e3o do LCR em neuropatias inflamat\u00f3rias, pode ser detectada uma chamada “dissemina\u00e7\u00e3o cialbuminosa” com aumento da prote\u00edna total no LCR com uma contagem normal de c\u00e9lulas e frequentemente uma desordem da barreira hemato-encef\u00e1lica.<\/p>\n\n

Agora, pela primeira vez, utilizando a citometria de fluxo, as composi\u00e7\u00f5es de c\u00e9lulas imunit\u00e1rias no LCR de doentes com GBS e CIDP foram analisadas e comparadas retrospectivamente [13]. Os perfis heterog\u00e9neos indicavam o envolvimento de diferentes popula\u00e7\u00f5es celulares na fisiopatologia das neuropatias imunit\u00e1rias agudas vs. cr\u00f3nicas.<\/p>\n\n

Na citometria de fluxo, um n\u00famero crescente de linf\u00f3citos T activados e n\u00e3o activados (HLA-DR+ vs. HLA-DR-) foram registados no LCR de doentes com neuropatias inflamat\u00f3rias. No entanto, a activa\u00e7\u00e3o das c\u00e9lulas T, bem como o aumento da prote\u00edna do LCR e a perturba\u00e7\u00e3o da barreira hemato-encef\u00e1lica s\u00e3o par\u00e2metros n\u00e3o espec\u00edficos para as neuropatias e s\u00e3o apenas pouco adequados para distinguir entre GBS e CIDP, uma vez que uma activa\u00e7\u00e3o de linf\u00f3citos T \u00e9 frequentemente encontrada em formas agudas e cr\u00f3nicas de neuropatias e tamb\u00e9m pode ser detectada noutras doen\u00e7as neurol\u00f3gicas. [14,15].<\/p>\n\n

Mais especificamente, uma propor\u00e7\u00e3o crescente de c\u00e9lulas assassinas naturais (NK) foi detectada no LCR da s\u00edndrome de Guillain-Barr\u00e9, enquanto que na polineuropatia inflamat\u00f3ria cr\u00f3nica desmielinizante o n\u00famero de c\u00e9lulas assassinas naturais em T (NKT) e de c\u00e9lulas CD8 foi aumentado.+<\/sup> Os linf\u00f3citos T foram aumentados (Fig. 2). <\/span>Numa compara\u00e7\u00e3o directa da s\u00edndrome de Guillain-Barr\u00e9 e da polineuropatia inflamat\u00f3ria cr\u00f3nica desmielinizante, a detec\u00e7\u00e3o de c\u00e9lulas T assassinas naturais seguidas pelos mon\u00f3citos cl\u00e1ssicos e intermedi\u00e1rios foi definida como o par\u00e2metro com a maior confian\u00e7a para diferenciar as duas entidades neurop\u00e1ticas. A imunoprofila\u00e7\u00e3o com as diferentes propor\u00e7\u00f5es de c\u00e9lulas NK, NKT e CD8+ T revela padr\u00f5es de c\u00e9lulas imunit\u00e1rias espec\u00edficas de doen\u00e7as e subtipos no LCR e fornece uma indica\u00e7\u00e3o do envolvimento de diferentes tipos de c\u00e9lulas citot\u00f3xicas na fisiopatologia das neuropatias imunit\u00e1rias agudas vs. cr\u00f3nicas. Al\u00e9m disso, com a ajuda dos perfis celulares individuais, uma avalia\u00e7\u00e3o prospectiva entre curso agudo e cr\u00f3nico poderia ser feita no momento da primeira manifesta\u00e7\u00e3o cl\u00ednica, facilitando assim a escolha da terapia.<\/p>\n\n

\"\"<\/figure>\n\n

O tratamento de escolha para a s\u00edndrome de Guillain-Barr\u00e9 \u00e9 a plasmaf\u00e9rese. Al\u00e9m disso, as imunoglobulinas intravenosas est\u00e3o tamb\u00e9m dispon\u00edveis como uma op\u00e7\u00e3o terap\u00eautica equivalente. Actualmente, devido a uma defici\u00eancia omnipresente de imunoglobulina, estas s\u00e3o normalmente utilizadas apenas secundariamente na pr\u00e1tica cl\u00ednica di\u00e1ria e s\u00e3o aplicadas em particular para a escalada terap\u00eautica ap\u00f3s a plasmaf\u00e9rese com uma melhoria insuficiente dos sintomas cl\u00ednicos. Enquanto os corticoster\u00f3ides n\u00e3o mostraram qualquer efeito no GBS [16], foi demonstrada uma boa efic\u00e1cia na polineuropatia cr\u00f3nica desmielinizante inflamat\u00f3ria, raz\u00e3o pela qual s\u00e3o utilizados como padr\u00e3o no tratamento do CIDP [17\u201319].<\/p>\n\n

Os pacientes com GBS e CIDP terapeuticamente ing\u00e9nuos n\u00e3o mostraram diferen\u00e7as significativas nos seus perfis de c\u00e9lulas imunes l\u00edquor-qu\u00edmicas em compara\u00e7\u00e3o com os pacientes que j\u00e1 recebem terapia. Em \u00faltima an\u00e1lise, isto significa que a diferencia\u00e7\u00e3o citom\u00e9trica de fluxo das neuropatias inflamat\u00f3rias tamb\u00e9m pode ter lugar durante a terapia e os perfis de c\u00e9lulas imunit\u00e1rias espec\u00edficos do subtipo no LCR n\u00e3o s\u00e3o distorcidos pela utiliza\u00e7\u00e3o de imunoglobulinas ou corticoster\u00f3ides, por exemplo.<\/p>\n\n

Para real\u00e7ar a relev\u00e2ncia cl\u00ednica das composi\u00e7\u00f5es de c\u00e9lulas imunit\u00e1rias espec\u00edficas do subtipo, foram detectados par\u00e2metros que reflectem a manifesta\u00e7\u00e3o cl\u00ednica das neruopatias. A gravidade das doen\u00e7as foi baseada na pontua\u00e7\u00e3o de incapacidade de Hughes e na Escala de Rankin modificada (mRS). Na s\u00edndrome de Guillain-Barr\u00e9, houve uma correla\u00e7\u00e3o entre o n\u00famero de linf\u00f3citos CD4+ T e mon\u00f3citos n\u00e3o cl\u00e1ssicos e a gravidade cl\u00ednica da doen\u00e7a. No CIDP, o n\u00edvel de prote\u00edna total no LCR correlacionou-se com a gravidade da doen\u00e7a. A citometria de fluxo do LCR estabeleceu uma nova abordagem de diagn\u00f3stico para identificar altera\u00e7\u00f5es espec\u00edficas de doen\u00e7as e subtipos em neuropatias inflamat\u00f3rias auto-imunes, facilitando a diferencia\u00e7\u00e3o do CIDP do GBS. No futuro, esta poderia ser a base para a avalia\u00e7\u00e3o do progn\u00f3stico e o desenvolvimento de novas terap\u00eauticas, e a an\u00e1lise celular imunol\u00f3gica poderia ser alargada a outras variantes neurop\u00e1ticas.<\/p>\n\n

Imunofen\u00f3tipos no espectro das doen\u00e7as neurol\u00f3gicas<\/h2>\n\n

Com base no aumento da informa\u00e7\u00e3o atrav\u00e9s da utiliza\u00e7\u00e3o da citometria de fluxo em diferentes compartimentos (sangue e LCR), a recolha de dados foi alargada a um espectro mais vasto de doen\u00e7as neurol\u00f3gicas. Num estudo transversal retrospectivo, as composi\u00e7\u00f5es celulares imunit\u00e1rias foram investigadas em doentes com doen\u00e7as auto-imunes, neurodegenerativas e vasculares. Tal como com as neuropatias imunit\u00e1rias, as doen\u00e7as auto-imunes do sistema nervoso central representam um grupo heterog\u00e9neo de patologias neuroinflamat\u00f3rias que ainda hoje requerem uma classifica\u00e7\u00e3o mais espec\u00edfica e um diagn\u00f3stico diferencial mais preciso e cujos patomecanismos subjacentes ainda n\u00e3o foram totalmente decifrados.<\/p>\n\n

Os par\u00e2metros individuais foram detectados por citometria de fluxo e as caracter\u00edsticas que melhor diferenciam as doen\u00e7as neuroinflamat\u00f3rias das patologias neurodegenerativas e vasculares foram extra\u00eddas utilizando an\u00e1lises multidimensionais [5].<\/p>\n\n

Os perfis celulares imunit\u00e1rios das doen\u00e7as neuroinflamat\u00f3rias auto-imunes mostraram semelhan\u00e7as entre si e diferen\u00e7as em rela\u00e7\u00e3o \u00e0s doen\u00e7as neurodegenerativas, vasculares e n\u00e3o-inflamat\u00f3rias (Fig. 3)<\/span>. Nos perfis celulares imunit\u00e1rios de todas as doen\u00e7as neuroinflamat\u00f3rias, a contagem de c\u00e9lulas e a propor\u00e7\u00e3o de linf\u00f3citos B no LCR foi aumentada, enquanto os mon\u00f3citos, as c\u00e9lulas naturais assassinas e as c\u00e9lulas T assassinas naturais foram reduzidas. Al\u00e9m disso, verificou-se que um n\u00famero reduzido de c\u00e9lulas CD56dim NK no sangue era indicativo da presen\u00e7a de uma doen\u00e7a inflamat\u00f3ria do SNC. Estas caracter\u00edsticas foram definidas como par\u00e2metros “pan-disease” para patologias auto-imunes do sistema nervoso central e assim indicavam altera\u00e7\u00f5es atrav\u00e9s de doen\u00e7as (Fig. 3) <\/span>. Na esclerose m\u00faltipla, o aumento do n\u00famero de c\u00e9lulas do QCA e uma expans\u00e3o significativa das c\u00e9lulas da linhagem de c\u00e9lulas B s\u00e3o conhecidos h\u00e1 muitos anos [20,21]. Curiosamente, estes par\u00e2metros eram modific\u00e1veis por imunoterapias e poderiam ser utilizados no futuro como biomarcadores para responder a terapias imunomoduladoras e melhorar a avalia\u00e7\u00e3o progn\u00f3stica e a gest\u00e3o da terapia.<\/p>\n\n

\u00a0<\/h2>\n\n

\"\"<\/h2>\n\n

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Composi\u00e7\u00f5es celulares imunit\u00e1rias em doen\u00e7as neuroinflamat\u00f3rias auto-imunes<\/h2>\n\n

As assinaturas de c\u00e9lulas imunit\u00e1rias espec\u00edficas de doen\u00e7as no LCR tamb\u00e9m foram estudadas em v\u00e1rias outras doen\u00e7as neurol\u00f3gicas.<\/p>\n\n

Num estudo retroperspectivo, as composi\u00e7\u00f5es celulares imunit\u00e1rias foram comparadas em esclerose m\u00faltipla recorrente (RRMS) e neurosarcoidose. A sarcoidose \u00e9 uma doen\u00e7a auto-imune multisist\u00e9mica que se manifesta com granulomas epitelioides em v\u00e1rios \u00f3rg\u00e3os, onde provoca reac\u00e7\u00f5es inflamat\u00f3rias locais atrav\u00e9s da infiltra\u00e7\u00e3o de macr\u00f3fagos [22]. Em cerca de 25% dos doentes, o sistema nervoso central \u00e9 tamb\u00e9m afectado [23]. Isto manifesta-se frequentemente com sintomas neurol\u00f3gicos que podem ser semelhantes aos de uma reca\u00edda de EM. O diagn\u00f3stico de sarcoidose inclui uma an\u00e1lise ao sangue com determina\u00e7\u00e3o de par\u00e2metros inflamat\u00f3rios, imunoglobulina G, ACE, receptor IL-2 sol\u00favel (sIL-2R) e neopterina, bem como um teste de fun\u00e7\u00e3o pulmonar, broncoscopia com lavagem broncoalveolar e biopsia transbr\u00f4nquica, uma radiografia do t\u00f3rax e, dependendo da manifesta\u00e7\u00e3o cl\u00ednica, outras imagens e exames interdisciplinares [24,25]. No que respeita \u00e0 diferencia\u00e7\u00e3o de outras doen\u00e7as inflamat\u00f3rias, os par\u00e2metros qu\u00edmicos laboratoriais (ACE, sIL-2R) provaram ser n\u00e3o espec\u00edficos e insuficientemente sens\u00edveis [26,27]. A distin\u00e7\u00e3o entre neurosarcoidose e esclerose m\u00faltipla tamb\u00e9m nem sempre \u00e9 clara na imagem, uma vez que as les\u00f5es da EM (les\u00f5es da mat\u00e9ria branca) e as altera\u00e7\u00f5es granulomatosas na neurosarcoidose se assemelham frequentemente na imagem por resson\u00e2ncia magn\u00e9tica [28]. A an\u00e1lise padr\u00e3o “simples” do QCA tamb\u00e9m mostra desvios semelhantes, tais como uma ligeira pleocitose [29]. O diagn\u00f3stico final da neurosarcoidose s\u00f3 pode, por vezes, ser feito por biopsia a partir de les\u00f5es granulomaisuspectadas no sistema nervoso central [30]. No entanto, tal bi\u00f3psia \u00e9 um procedimento invasivo e arriscado e s\u00f3 deve ser realizada ap\u00f3s uma cuidadosa avalia\u00e7\u00e3o de risco-benef\u00edcio. Para evitar uma medida t\u00e3o invasiva, \u00e9 essencial o estabelecimento de novas ferramentas de diagn\u00f3stico. A citometria de fluxo do LCR e sangue de doentes com neurosarcoidose e esclerose m\u00faltipla foi avaliada retrospectivamente sob este aspecto.<\/p>\n\n

Na citometria de fluxo, a neurosarcoidose foi surpreendentemente bem distinguida da esclerose m\u00faltipla por uma maior propor\u00e7\u00e3o de plasm\u00f3citos, mon\u00f3citos interm\u00e9dios e n\u00e3o cl\u00e1ssicos no sangue, enquanto o n\u00famero de linf\u00f3citos T no sangue foi reduzido na neurosarcoidose. O LCR mostrou par\u00e2metros parcialmente sobrepostos em ambas as doen\u00e7as, pelo que a propor\u00e7\u00e3o de linf\u00f3citos T CD4 positivos foi especificamente aumentada na neuroarcoidose. A diferencia\u00e7\u00e3o das duas doen\u00e7as foi optimizada pela integra\u00e7\u00e3o multidimensional das composi\u00e7\u00f5es celulares imunol\u00f3gicas do LCR e do sangue (Fig. 3)<\/span>. A predomin\u00e2ncia de linf\u00f3citos T CD4 positivos activados e uma rela\u00e7\u00e3o CD4\/CD8 aumentada no LCR, bem como um aumento da propor\u00e7\u00e3o de plasm\u00f3citos no sangue, foram definidos como caracter\u00edsticas da neurosarcoidose [14]. A detec\u00e7\u00e3o de plasm\u00f3citos no l\u00edquido cefalorraquidiano, bem como a s\u00edntese intratecal de IgG e bandas oligoclonais foi pioneira para a esclerose m\u00faltipla.<\/p>\n\n

As composi\u00e7\u00f5es celulares imunit\u00e1rias individuais no LCR permitem assim uma melhor diferencia\u00e7\u00e3o entre estas duas doen\u00e7as inflamat\u00f3rias do sistema nervoso central e podem permitir dispensar confirma\u00e7\u00f5es de diagn\u00f3stico bi\u00f3ptico na pr\u00e1tica cl\u00ednica di\u00e1ria e simplificar a escolha da terapia (imunossupressores cl\u00e1ssicos vs. terapias de MS-moduladores).<\/p>\n\n

Al\u00e9m disso, o foco foi colocado na diferencia\u00e7\u00e3o de doen\u00e7as auto-imunes distintas do sistema nervoso central e os perfis das c\u00e9lulas imunit\u00e1rias foram comparados em esclerose m\u00faltipla, neuromielite \u00f3ptica (NMOSD), encefalite auto-imune (AIE) e s\u00edndrome de Susac. NMOSD caracteriza-se por neurite \u00f3ptica recorrente e mielite com les\u00f5es inflamat\u00f3rias de longa dura\u00e7\u00e3o [31]. A encefalite auto-imune pode manifestar-se clinicamente com dores de cabe\u00e7a, febre, vigil\u00e2ncia reduzida, crises epil\u00e9pticas, mas tamb\u00e9m com d\u00e9fices cognitivos. Na encefalite receptora NMDA (NMDARE), ocorrem frequentemente d\u00e9fices cognitivos, perturba\u00e7\u00f5es mn\u00e9sticas e sintomas psic\u00f3ticos [32, 33]. A s\u00edndrome de Susac \u00e9 uma endotelipatia mediada por c\u00e9lulas CD8+ T dos pequenos vasos sangu\u00edneos do SNC e \u00e9 clinicamente caracterizada por uma tr\u00edade de encefalopatia, perda auditiva e visual [34,35].<\/p>\n\n

Enquanto estas doen\u00e7as mostram altera\u00e7\u00f5es semelhantes entre si nas an\u00e1lises padr\u00e3o do LCR [36], a citometria de fluxo revelou altera\u00e7\u00f5es subtipo espec\u00edficas na composi\u00e7\u00e3o das c\u00e9lulas imunit\u00e1rias.<\/p>\n\n

Para al\u00e9m da s\u00edntese de IgG intratecal anteriormente conhecida, a s\u00edntese de IgA e IgM intratecal tamb\u00e9m foram identificadas como caracter\u00edsticas do RRMS. Nas doen\u00e7as de neuromielite do espectro \u00f3ptico, um n\u00famero reduzido de c\u00e9lulas CD56bright NK no sangue e um aumento da concentra\u00e7\u00e3o de lactato no l\u00edquido cefalorraquidiano eram particularmente evidentes. A s\u00edndrome de Susac foi caracterizada pela detec\u00e7\u00e3o de linf\u00f3citos CD4+ e CD8+ T no sangue e por um aumento da propor\u00e7\u00e3o de linf\u00f3citos CD8+ T activados (HLA-DR+) no l\u00edquido cefalorraquidiano e no sangue. Caracter\u00edstica da encefalite auto-imune foi a detec\u00e7\u00e3o de aumento da contagem de linf\u00f3citos no LCR e no sangue, bem como um aumento do n\u00famero de c\u00e9lulas T naturais, mon\u00f3citos cl\u00e1ssicos e mon\u00f3citos CD14+ CD16+ no LCR.<\/p>\n\n

Com a ajuda da an\u00e1lise citom\u00e9trica de c\u00e9lulas imunit\u00e1rias de fluxo a partir do l\u00edquido cefalorraquidiano, o RRMS pode assim ser diferenciado das outras entidades com um elevado grau de confian\u00e7a. Numa an\u00e1lise multidimensional, os plasm\u00f3citos no LCR e na s\u00edntese intratecal de IgG foram definidos como os melhores par\u00e2metros para diferenciar o RRMS de outras doen\u00e7as auto-imunes do SNC.<\/p>\n\n

Os perfis celulares imunit\u00e1rios dos doentes com esclerose m\u00faltipla recorrente em diferentes fases da doen\u00e7a foram examinados com mais detalhe. Independentemente da fase da doen\u00e7a, os par\u00e2metros ‘pan-doen\u00e7a’ foram alterados na mesma medida. Em contraste, com a progress\u00e3o da doen\u00e7a, houve uma redu\u00e7\u00e3o adicional em CD56dim<\/sup> C\u00e9lulas NK no sangue e um aumento de linf\u00f3citos intratecais B, c\u00e9lulas plasm\u00e1ticas e s\u00edntese de IgG intratecais. (Fig. 3). <\/span>Com a ajuda de par\u00e2metros espec\u00edficos de c\u00e9lulas imunit\u00e1rias que se correlacionam com a gravidade e progress\u00e3o da doen\u00e7a, novos marcadores poderiam ser definidos atrav\u00e9s de monitoriza\u00e7\u00e3o cont\u00ednua que facilitam a avalia\u00e7\u00e3o da actividade da doen\u00e7a e permitem a modula\u00e7\u00e3o da terapia precoce para influenciar positivamente o curso da doen\u00e7a. Dados adicionais de estudos longitudinais ao longo de v\u00e1rias d\u00e9cadas poderiam identificar par\u00e2metros que facilitem a detec\u00e7\u00e3o da transi\u00e7\u00e3o de EM recorrente-remitente para EM progressiva secund\u00e1ria. Por conseguinte, s\u00e3o ainda necess\u00e1rios estudos confirmat\u00f3rios prospectivos.<\/p>\n\n

A an\u00e1lise precisa dos perfis de c\u00e9lulas imunit\u00e1rias vari\u00e1veis em diferentes entidades da doen\u00e7a dever\u00e1 ajudar a novos conhecimentos sobre patomecanismos comuns e distintos em doen\u00e7as individuais no futuro, mas a identifica\u00e7\u00e3o de outros par\u00e2metros discriminat\u00f3rios requer coortes maiores, especialmente de doentes com doen\u00e7as raras como a NMOSD ou a s\u00edndrome de Susac. No futuro, a citometria de fluxo n\u00e3o se limitar\u00e1 ao campo da neurologia, mas ser\u00e1 alargada a outras disciplinas m\u00e9dicas.<\/p>\n\n

An\u00e1lises de c\u00e9lulas imunes no campo interdisciplinar<\/h2>\n\n

Numerosas doen\u00e7as neuroinflamat\u00f3rias podem tamb\u00e9m manifestar-se com sintomas psiqui\u00e1tricos, por exemplo, encefalites auto-imunes, como a encefalite receptora de NMDA (NMDARE). Os erros de diagn\u00f3stico que classificam a AIE como uma perturba\u00e7\u00e3o prim\u00e1ria do grupo de perturba\u00e7\u00f5es psiqui\u00e1tricas ocorrem uma e outra vez. As consequ\u00eancias resultantes podem ser graves. Mesmo actualmente, o diagn\u00f3stico diferencial entre doen\u00e7as auto-imunes psiqui\u00e1tricas e neuroinflamat\u00f3rias \u00e9 um desafio na rotina cl\u00ednica da neurologia e psiquiatria. Al\u00e9m disso, o espectro das perturba\u00e7\u00f5es psiqui\u00e1tricas inclui tamb\u00e9m numerosas entidades cuja patog\u00e9nese ainda n\u00e3o \u00e9 totalmente compreendida [37]. Nos \u00faltimos anos, foram tamb\u00e9m discutidos mecanismos imunol\u00f3gicos e auto-imunes, que podem tamb\u00e9m contribuir para o desenvolvimento de doen\u00e7as psiqui\u00e1tricas [38\u201341]. Por esta raz\u00e3o, analis\u00e1mos dados citom\u00e9tricos de fluxo no contexto de perturba\u00e7\u00f5es psiqui\u00e1tricas. No diagn\u00f3stico de doen\u00e7as psiqui\u00e1tricas, a an\u00e1lise do l\u00edquido cefalorraquidiano tem sido utilizada at\u00e9 agora principalmente para excluir doen\u00e7as org\u00e2nicas.<\/p>\n\n

Num estudo retrospectivo, foram recolhidos dados sobre a composi\u00e7\u00e3o das c\u00e9lulas imunit\u00e1rias em doen\u00e7as do espectro prim\u00e1rio da psicose (incluindo esquizofrenia, dist\u00farbios delirantes, dist\u00farbios psic\u00f3ticos agudos e transit\u00f3rios e dist\u00farbios esquizoafectivos) e comparados com as assinaturas de c\u00e9lulas imunit\u00e1rias de doen\u00e7as neuroinflamat\u00f3rias, em particular NMDARE – um subtipo comum de AIE.<\/p>\n\n

Com a ajuda da citometria de fluxo, foram detectados par\u00e2metros e foram criadas pontua\u00e7\u00f5es multidimensionais, que n\u00e3o s\u00f3 servem o diagn\u00f3stico de exclus\u00e3o, mas tamb\u00e9m apoiam e facilitam o diagn\u00f3stico de perturba\u00e7\u00f5es psic\u00f3ticas prim\u00e1rias. Al\u00e9m disso, a composi\u00e7\u00e3o de c\u00e9lulas imunit\u00e1rias espec\u00edficas fornece provas do envolvimento de certas subpopula\u00e7\u00f5es na g\u00e9nese e nos mecanismos patol\u00f3gicos das doen\u00e7as psiqui\u00e1tricas. Pesquisas anteriores mostraram evid\u00eancias de aumento da contagem de leuc\u00f3citos no sangue de doentes com perturba\u00e7\u00f5es psic\u00f3ticas [42]. As an\u00e1lises padr\u00e3o do LCR mostraram um aumento da prote\u00edna do LCR em psicoses prim\u00e1rias e frequentemente a presen\u00e7a de uma desordem da barreira hemato-encef\u00e1lica. No entanto, n\u00e3o existem par\u00e2metros laboratoriais e liquorqu\u00edmicos espec\u00edficos e n\u00e3o tem sido poss\u00edvel at\u00e9 agora uma diferencia\u00e7\u00e3o fi\u00e1vel de doen\u00e7as neurol\u00f3gicas atrav\u00e9s de testes padr\u00e3o de sangue e licor.<\/p>\n\n

A citometria de fluxo mostrou altera\u00e7\u00f5es espec\u00edficas do compartimento no LCR e no sangue em doentes com psicoses prim\u00e1rias [43]. A composi\u00e7\u00e3o espec\u00edfica das c\u00e9lulas imunit\u00e1rias no LCR em perturba\u00e7\u00f5es psic\u00f3ticas prim\u00e1rias caracterizou-se por um aumento dos linf\u00f3citos T positivos CD8 e mon\u00f3citos, especialmente mon\u00f3citos n\u00e3o cl\u00e1ssicos. Por outro lado, o n\u00famero de linf\u00f3citos no l\u00edquido cefalorraquidiano foi reduzido (vis\u00e3o geral 1) <\/span>. O sangue mostrou um n\u00famero crescente de c\u00e9lulas assassinas naturais e mon\u00f3citos. Especificamente, o n\u00famero de mon\u00f3citos cl\u00e1ssicos foi aumentado, enquanto que a propor\u00e7\u00e3o de mon\u00f3citos intermedi\u00e1rios no sangue foi diminu\u00edda. A encefalite receptora NMDA (NMDARE) \u00e9 frequentemente acompanhada por sintomas psic\u00f3ticos e pode ser dif\u00edcil de distinguir clinicamente das psicoses prim\u00e1rias. Apesar da possibilidade de determinar os anticorpos receptores espec\u00edficos anti-NMDA, s\u00e3o poss\u00edveis diagn\u00f3sticos incorrectos, uma vez que tamb\u00e9m existem variantes de encefalite auto-imune anti-corpos-negativa [44]. Por esta raz\u00e3o, as duas doen\u00e7as foram comparadas em particular. O perfil citom\u00e9trico de c\u00e9lulas imunit\u00e1rias de fluxo mostrou que o NMADRE pode ser bem diferenciado das perturba\u00e7\u00f5es psic\u00f3ticas prim\u00e1rias por uma maior propor\u00e7\u00e3o de linf\u00f3citos, c\u00e9lulas B e mon\u00f3citos no LCR e a detec\u00e7\u00e3o de plasm\u00f3citos no sangue (Resumo 1).<\/span> Al\u00e9m disso, a citometria de fluxo detectou um aumento da propor\u00e7\u00e3o de c\u00e9lulas assassinas naturais no sangue de doentes com sintomas psic\u00f3ticos positivos.<\/p>\n\n

\"\"<\/figure>\n\n

As perturba\u00e7\u00f5es psic\u00f3ticas prim\u00e1rias s\u00e3o um grupo heterog\u00e9neo cuja complexa fisiopatologia ainda n\u00e3o \u00e9 compreendida e inexplorada em muitos aspectos em pormenor. A investiga\u00e7\u00e3o anterior indica desregula\u00e7\u00e3o do sistema imunit\u00e1rio e componentes inflamat\u00f3rios no sistema nervoso central em doentes com perturba\u00e7\u00f5es psic\u00f3ticas prim\u00e1rias. Os resultados citrom\u00e9tricos de fluxo mostram altera\u00e7\u00f5es na composi\u00e7\u00e3o das c\u00e9lulas imunit\u00e1rias no l\u00edquido cefalorraquidiano e sugerem que os mecanismos imunol\u00f3gicos, especialmente a imunidade inata, juntamente com uma fun\u00e7\u00e3o de barreira perturbada da barreira hemato-encef\u00e1lica contribuem para o desenvolvimento de perturba\u00e7\u00f5es psic\u00f3ticas prim\u00e1rias. A citometria de fluxo identificou altera\u00e7\u00f5es t\u00edpicas da composi\u00e7\u00e3o das c\u00e9lulas imunit\u00e1rias no LCR e no sangue, que est\u00e3o na base do diagn\u00f3stico de psicose prim\u00e1ria e apoiam a hip\u00f3tese imunol\u00f3gica de psicose prim\u00e1ria.<\/p>\n\n

Resumo<\/h2>\n\n

Com a ajuda da citometria de fluxo do l\u00edquido cefalorraquidiano, foi estabelecida a possibilidade de novas an\u00e1lises de c\u00e9lulas imunit\u00e1rias espec\u00edficas de doen\u00e7as e subtipos. Os exames citom\u00e9tricos de fluxo do LCR permitiram uma classifica\u00e7\u00e3o espec\u00edfica das doen\u00e7as neuroinflamat\u00f3rias do sistema nervoso central e perif\u00e9rico. As composi\u00e7\u00f5es celulares imunit\u00e1rias no QCA de pacientes com GBS vs. CIDP podem distinguir as duas entidades com maior confian\u00e7a. Al\u00e9m disso, pode ser feita uma avalia\u00e7\u00e3o precoce do curso da doen\u00e7a (aguda-monof\u00e1sica vs. cr\u00f3nica-recorrente) no momento do diagn\u00f3stico inicial de neuropatia inflamat\u00f3ria.<\/p>\n\n

Al\u00e9m disso, as doen\u00e7as inflamat\u00f3rias auto-imunes do sistema nervoso central mostram altera\u00e7\u00f5es individuais nas subpopula\u00e7\u00f5es celulares no sangue, bem como no l\u00edquido cefalorraquidiano. Estas varia\u00e7\u00f5es espec\u00edficas da doen\u00e7a dever\u00e3o melhorar a classifica\u00e7\u00e3o em entidades individuais no futuro e, assim, facilitar o diagn\u00f3stico diferencial. Especialmente no caso de resultados pouco claros noutros exames, por exemplo, em imagens ou no caso de altera\u00e7\u00f5es qu\u00edmicas laboratoriais n\u00e3o espec\u00edficas, a an\u00e1lise citom\u00e9trica de fluxo do l\u00edquido cefalorraquidiano pode ser pioneira. Por exemplo, ao detectar les\u00f5es n\u00e3o espec\u00edficas em resson\u00e2ncia magn\u00e9tica, por exemplo, les\u00f5es isqu\u00e9micas vs. les\u00f5es de mat\u00e9ria branca (em EM, NMOSD ou s\u00edndrome de Susac), ou granulomas no sistema nervoso central vs. les\u00f5es de EM, o diagn\u00f3stico pode ser suplementado com an\u00e1lise de c\u00e9lulas imunit\u00e1rias.<\/p>\n\n

Al\u00e9m disso, um diagn\u00f3stico precoce pode preparar o caminho para decis\u00f5es terap\u00eauticas, tais como o uso de medicamentos imunomoduladores, e a influ\u00eancia sobre o curso da doen\u00e7a pode ser optimizada atrav\u00e9s de uma escolha determinada de terapia. O objectivo das an\u00e1lises citom\u00e9tricas de fluxo futuro do LCR poderia ser a detec\u00e7\u00e3o de vari\u00e1veis celulares imunes que reflictam os efeitos terap\u00eauticos e permitam uma melhor avalia\u00e7\u00e3o da progress\u00e3o da doen\u00e7a.<\/p>\n\n

Al\u00e9m disso, o reconhecimento de assinaturas de c\u00e9lulas imunit\u00e1rias espec\u00edficas de doen\u00e7as aponta o caminho para o envolvimento de certas popula\u00e7\u00f5es celulares no desenvolvimento de doen\u00e7as neurol\u00f3gicas e em mecanismos auto-imunes no sistema nervoso central e perif\u00e9rico. Constitui assim a base para an\u00e1lises mais profundas dos processos fisiopatol\u00f3gicos.<\/p>\n\n

Em resumo, a citometria de fluxo do LCR representa uma nova op\u00e7\u00e3o de diagn\u00f3stico para a an\u00e1lise de perfis espec\u00edficos de c\u00e9lulas imunit\u00e1rias. A citometria de fluxo de pacientes com neuropatias imunol\u00f3gicas, doen\u00e7as neuroinflamat\u00f3rias auto-imunes do SNC ou dist\u00farbios psic\u00f3ticos mostrou altera\u00e7\u00f5es imuno-celulares espec\u00edficas da doen\u00e7a em compartimentos perif\u00e9ricos e intratecais, sugerindo o envolvimento do sistema imunit\u00e1rio inato e mecanismos imunol\u00f3gicos na etiologia das doen\u00e7as. Em particular, foi demonstrado que n\u00e3o s\u00f3 os componentes celulares no sangue mas tamb\u00e9m as c\u00e9lulas imunit\u00e1rias espec\u00edficas no LCR desempenham um papel decisivo na fisiopatologia das doen\u00e7as neurol\u00f3gicas.<\/p>\n\n

Com a cria\u00e7\u00e3o de uma base de dados \u00fanica de dados citom\u00e9tricos de fluxo de amostras de fluidos cefalorraquidianos de alta qualidade, foi criada a base para projectos de investiga\u00e7\u00e3o mais aprofundados no Departamento de Neurologia do Hospital Universit\u00e1rio de M\u00fcnster.<\/p>\n\n

Identificando par\u00e2metros singulares e estabelecendo pontua\u00e7\u00f5es multifactoriais, poder\u00e3o ser gerados no futuro perfis de c\u00e9lulas imunit\u00e1rias espec\u00edficos de doen\u00e7as e subclasses, que poder\u00e3o ser utilizados como novos instrumentos de diagn\u00f3stico na pr\u00e1tica cl\u00ednica di\u00e1ria e revolucionar o diagn\u00f3stico, bem como a terapia de neuropatias imunit\u00e1rias e outras doen\u00e7as.<\/p>\n\n

Mensagens Take-Home<\/h2>\n\n
    \n
  • A citometria de fluxo de c\u00e9lulas do l\u00edquido cefalorraquidiano permite a identifica\u00e7\u00e3o de perfis de c\u00e9lulas imunit\u00e1rias espec\u00edficas de doen\u00e7as.<\/li>\n\n\n\n
  • Determinadas popula\u00e7\u00f5es de leuc\u00f3citos foram identificadas como marcadores de doen\u00e7as individuais e podem estar envolvidas nos patomecanismos individuais, por exemplo c\u00e9lulas T assassinas naturais para diferenciar as neuropatias imunit\u00e1rias agudas das cr\u00f3nicas. Os mon\u00f3citos no l\u00edquido cefalorraquidiano poderiam distinguir a psicose prim\u00e1ria da encefalite receptora de NDMA.<\/li>\n\n\n\n
  • As an\u00e1lises celulares prospectivas do LCR poderiam melhorar a selec\u00e7\u00e3o e o acompanhamento das terapias na pr\u00e1tica cl\u00ednica di\u00e1ria.<\/li>\n\n\n\n
  • A citometria de fluxo das c\u00e9lulas do LCR pode melhorar o diagn\u00f3stico de doen\u00e7as com manifesta\u00e7\u00f5es cl\u00ednicas n\u00e3o espec\u00edficas e sintomas sobrepostos, facilitando assim as decis\u00f5es de tratamento.<\/li>\n<\/ul>\n\n

    Literatura:<\/p>\n\n

      \n
    1. Iliff JJ, et al: Uma via paravascular facilita o fluxo do LCR atrav\u00e9s do par\u00eanquima cerebral e a elimina\u00e7\u00e3o de solutos intersticiais, incluindo a beta amil\u00f3ide. Sci Transl Med 2012; 4(147): 147ra111.<\/li>\n\n\n\n
    2. Schlager C, et al.: Tr\u00e1fico de c\u00e9lulas T de efeito entre as leptomeninges e o l\u00edquido cefalorraquidiano. Natureza 2016; 530(7590): 349-353.<\/li>\n\n\n\n
    3. Engelhardt B, Vajkoczy P, Weller RO: Os movedores e formadores em privil\u00e9gio imunit\u00e1rio do SNC. Nat Immunol 2017; 18(2): 123-131.<\/li>\n\n\n\n
    4. Louveau A, et al.: Caracter\u00edsticas estruturais e funcionais dos vasos linf\u00e1ticos do sistema nervoso central. Natureza 2015; 523(7560): 337-341.<\/li>\n\n\n\n
    5. Gross CC, et al.: Classifica\u00e7\u00e3o de doen\u00e7as neurol\u00f3gicas utilizando an\u00e1lise multi-dimensional do QCA. Brain, 2021. 144(9): 2625-2634.<\/li>\n\n\n\n
    6. Han S, et al: Imunofenotipagem exaustiva de c\u00e9lulas do l\u00edquido cefalorraquidiano em doentes com doen\u00e7as neuroimunol\u00f3gicas. J Immunol 2014; 192(6): 2551-2563.<\/li>\n\n\n\n
    7. Pawlowski M, et al.: Relev\u00e2ncia dos n\u00edveis elevados de mon\u00f3citos de fluido cerebrospinal em doentes com dem\u00eancia frontotemporal. Envelhecimento do Neurobiol 2018; 62: 45-52.<\/li>\n\n\n\n
    8. Alvermann S, et al.: Immunophenotyping of cerebrospinal fluid cells in multiple sclerosis: in search of biomarkers. JAMA Neurol 2014; 71(7): 905-912.<\/li>\n\n\n\n
    9. Gross CC, et al: A regula\u00e7\u00e3o da actividade das c\u00e9lulas T em esclerose m\u00faltipla mediada por NK \u00e9 reconstitu\u00edda pela modula\u00e7\u00e3o do receptor IL-2. Proc Natl Acad Sci USA 2016; 113(21): E2973-2982.<\/li>\n\n\n\n
    10. Lueg G, et al.: Relev\u00e2ncia cl\u00ednica da activa\u00e7\u00e3o espec\u00edfica de c\u00e9lulas T no sangue e l\u00edquido cefalorraquidiano de doentes com doen\u00e7a de Alzheimer ligeira. Envelhecimento do Neurobiol 2015; 36(1): 81-89.<\/li>\n\n\n\n
    11. Wiendl HK, Kieseier B, Meuth S: Perguntas e respostas sobre neuroimunologia 2015: 191-215.<\/li>\n\n\n\n
    12. van Doorn PA: Diagn\u00f3stico, tratamento e progn\u00f3stico da s\u00edndrome de Guillain-Barre (GBS). Imprensa Med 2013; 42(6 Pt 2): e193-201.<\/li>\n\n\n\n
    13. Heming M, et al: Immune Cell Profiling of the Cerebrospinal Fluid Provides Pathogenetic Insights Into Inflammatory Neuropathies. Immunol frontal 2019; 10: 515.<\/li>\n\n\n\n
    14. Heming M, et al: Os perfis de leuc\u00f3citos no sangue e no LCR distinguem a neurosarcoidose da esclerose m\u00faltipla. J Neuroimmunol 2020; 341: 577171.<\/li>\n\n\n\n
    15. Li S, et al: IL-17 e IL-22 em fluido cerebrospinal e plasma s\u00e3o elevados na s\u00edndrome de Guillain-Barr\u00e9. Mediadores Inflamm 2012; 2012: 260473.<\/li>\n\n\n\n
    16. Ensaio duplo-cego de metilprednisolona intravenosa na s\u00edndrome de Guillain-Barr\u00e9. Guillain-Barre Syndrome de Steroid Trial GrouLancet, 1993. 341(8845): 586-590.<\/li>\n\n\n\n
    17. Kieseier BC, et al: Neuropatias imunizadas. Nat Rev Dis Primers 2018; 4(1): 31.<\/li>\n\n\n\n
    18. Nobile-Orazio E, Gallia F: Actualiza\u00e7\u00e3o sobre o tratamento da poliradiculoneuropatia desmielinizante cr\u00f3nica inflamat\u00f3ria. Curr Opini\u00e3o Neurol 2015; 28(5): 480-485.<\/li>\n\n\n\n
    19. Nobile-Orazio E, et al: Imunoglobulina intravenosa versus metilprednisolona intravenosa para poliradiculoneuropatia desmielinizante cr\u00f3nica: um ensaio controlado aleat\u00f3rio. Lancet Neurol 2012; 11(6): 493-502.<\/li>\n\n\n\n
    20. Kraus J, et al: Linf\u00f3citos CD45RA+ ICAM-3+ em l\u00edquido cefalorraquidiano e sangue como marcadores da actividade da doen\u00e7a em doentes com esclerose m\u00faltipla. Acta Neurol Scand 2000; 102(5): 326-332.<\/li>\n\n\n\n
    21. Cepok S, et al: Padr\u00f5es de patologia do l\u00edquido cerebrospinal correlacionam-se com a progress\u00e3o da doen\u00e7a na esclerose m\u00faltipla. C\u00e9rebro 2001; 124(Pt 11): 2169-2176.<\/li>\n\n\n\n
    22. Chen ES, Moller DR: Sarcoidose – progresso cient\u00edfico e desafios cl\u00ednicos. Nat Rev Rheumatol 2011; 7(8): 457-467.<\/li>\n\n\n\n
    23. Iannuzzi MC, Rybicki BA, Teirstein AS: Sarcoidose. N Engl J Med 2007; 357(21): 2153-2165.<\/li>\n\n\n\n
    24. Bradshaw MJ, et al: Neurosarcoidose: Patofisiologia, Diagn\u00f3stico, e Tratamento. Neurol Neuroimmunol Neuroinflamm, 2021. 8(6).<\/li>\n\n\n\n
    25. Seve P, et al: Sarcoidose: A Clinical Overview from Symptoms to Diagnosis, Cells 2021; 10(4).<\/li>\n\n\n\n
    26. Bharwani KD, et al: Elevated Plasma Levels of sIL-2R in Complex Regional Pain Syndrome: A Pathogenic Role for T-Lymphocytes? Mediadores Inflamm 2017: 2764261.<\/li>\n\n\n\n
    27. Cai B, et al.: Micro-inflama\u00e7\u00e3o caracterizada por perturba\u00e7\u00f5es do equil\u00edbrio Treg\/Teff com aumento do sIL-2R em doentes com diabetes tipo 2. Exp Clin Endocrinol Diabetes 2013; 121(4): 214-219.<\/li>\n\n\n\n
    28. Spencer TS, et al: Manifesta\u00e7\u00f5es de imagem de resson\u00e2ncia cl\u00ednica e magn\u00e9tica de neurosarcoidose. Semin Arthritis Rheum 2005; 34(4): 649-661.<\/li>\n\n\n\n
    29. Pawate S, Moses H, Sriram S: Apresenta\u00e7\u00f5es e resultados da neurosarcoidose: um estudo de 54 casos. QJM 2009; 102(7): 449-460.<\/li>\n\n\n\n
    30. Wegener S, et al: Neurosarcoidose clinicamente isolada: uma via de diagn\u00f3stico recomendada. Eur Neurol 2015; 73(1-2): 71-77.<\/li>\n\n\n\n
    31. Jarius S, Wildemann B, Paul F: Neuromyelitis optica: caracter\u00edsticas cl\u00ednicas, imunopatogenia e tratamento. Clin Exp Immunol 2014; 176(2): 149-164.<\/li>\n\n\n\n
    32. Dalmau J, Graus F: Encefalite mediada por anticorpos. N Engl J Med 2018; 378(9): 840-851.<\/li>\n\n\n\n
    33. Dalmau J, et al: Uma actualiza\u00e7\u00e3o sobre a encefalite receptora anti-NMDA para neurologistas e psiquiatras: mecanismos e modelos. Lancet Neurol 2019; 18(11): 1045-1057.<\/li>\n\n\n\n
    34. Vishnevskia-Dai V, et al: S\u00edndrome de Susac: caracter\u00edsticas cl\u00ednicas, classifica\u00e7\u00e3o cl\u00ednica, e progn\u00f3stico a longo prazo. Medicina (Baltimore), 2016; 95(43): e5223.<\/li>\n\n\n\n
    35. Gross CC, et al: CD8(+) A endoteliopatia mediada por c\u00e9lulas T \u00e9 um mecanismo de neuro-inflama\u00e7\u00e3o de grande amplitude na s\u00edndrome de Susac. Nat Commun 2019; 10(1): 5779.<\/li>\n\n\n\n
    36. Toledano M, Weinshenker BG, Solomon AJ: A Clinical Approach to the Differential Diagnosis of Multiple Sclerosis (Uma Abordagem Cl\u00ednica ao Diagn\u00f3stico Diferencial da Esclerose M\u00faltipla). Curr Neurol Neurosci Rep 2015; 15(8): 57.<\/li>\n\n\n\n
    37. Fritz B: Sobre o diagn\u00f3stico serol\u00f3gico da esquizofrenia a partir do l\u00edquido cefalorraquidiano de acordo com o m\u00e9todo de Lehmann-Facius. 1939\/12. 165: 462-467.<\/li>\n\n\n\n
    38. van Kesteren CF, et al: Envolvimento imunit\u00e1rio na patog\u00e9nese da esquizofrenia: uma meta-an\u00e1lise em estudos p\u00f3s-morte do c\u00e9rebro. Transl Psychiatry 2017; 7(3): e1075.<\/li>\n\n\n\n
    39. Mazza MG, et al: Rela\u00e7\u00e3o neutr\u00f3filo-linf\u00f3citos, rela\u00e7\u00e3o mon\u00f3cito-linf\u00f3citos e rela\u00e7\u00e3o plaquetas-linf\u00f3citos em psicose n\u00e3o afectiva: Uma meta-an\u00e1lise e revis\u00e3o sistem\u00e1tica. Mundo J Biol Psiquiatria 2020; 21(5): 326-338.<\/li>\n\n\n\n
    40. Fernandez-Egea E, et al: Peripheral Immune Cell Populations Associated with Cognitive Deficits and Negative Symptoms of Treatment-Resistant Schizophrenia. PLoS One 2016; 11(5): e0155631.<\/li>\n\n\n\n
    41. Doorduin J, et al: Neuroinflammation in schizophrenia related psychosis: a PET study. J Nucl Med 2009; 50(11): 1801-1807.<\/li>\n\n\n\n
    42. Steiner J, et al: Innate Immune Cells and C-Reactive Protein in Acute First-Episode Psychosis and Schizophrenia: Relationship to Psychopathology and Treatment. Schizophr Bull 2020; 46(2): 363-373.<\/li>\n\n\n\n
    43. Rauber S, et al.: A citometria de fluxo de fluidos cerebrais distingue as perturba\u00e7\u00f5es do espectro da psicose dos diagn\u00f3sticos diferenciais. Mol Psychiatry 2021; 26(12): 7661-7670.<\/li>\n\n\n\n
    44. Dalmau J, et al: Anti-NMDA-receptor encephalitis: s\u00e9rie de casos e an\u00e1lise dos efeitos dos anticorpos. Lancet Neurol 2008; 7(12): 1091-1098.<\/li>\n<\/ol>\n\n

      InFo NEUROLOGIA & PSYCHIATRY 2022; 20(3): 6-14<\/em><\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"

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