{"id":377721,"date":"2024-05-06T00:01:00","date_gmt":"2024-05-05T22:01:00","guid":{"rendered":"https:\/\/medizinonline.com\/?p=377721"},"modified":"2024-04-25T22:23:56","modified_gmt":"2024-04-25T20:23:56","slug":"a-proteina-2-que-contem-o-dominio-lem-e-essencial-para-o-desenvolvimento-do-coracao","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/medizinonline.com\/pt-pt\/a-proteina-2-que-contem-o-dominio-lem-e-essencial-para-o-desenvolvimento-do-coracao\/","title":{"rendered":"A prote\u00edna 2, que cont\u00e9m o dom\u00ednio LEM, \u00e9 essencial para o desenvolvimento do cora\u00e7\u00e3o"},"content":{"rendered":"\n

A integridade do inv\u00f3lucro nuclear \u00e9 essencial para a compartimenta\u00e7\u00e3o do n\u00facleo e do citoplasma. \u00c9 importante referir que as muta\u00e7\u00f5es nos genes que codificam o envelope nuclear e as prote\u00ednas associadas s\u00e3o a segunda causa mais comum de cardiomiopatia dilatada familiar. Uma dessas prote\u00ednas NE que causa cardiomiopatia em humanos e influencia o desenvolvimento do cora\u00e7\u00e3o em ratos \u00e9 a Lem2.<\/strong><\/p>\n\n\n\n

(vermelho)<\/em> Nas c\u00e9lulas eucari\u00f3ticas, o inv\u00f3lucro nuclear (NE) separa os compartimentos nuclear e citoplasm\u00e1tico. Por baixo da NE encontra-se a l\u00e2mina nuclear, que \u00e9 constitu\u00edda pelas laminas A\/C, B1 e B2 [2]. Pensa-se que a l\u00e2mina nuclear confere rigidez estrutural ao n\u00facleo e desempenha um papel na liga\u00e7\u00e3o da cromatina e na regula\u00e7\u00e3o da express\u00e3o gen\u00e9tica [3,4]. O NE est\u00e1 intercalado com o complexo LINC (Linker of Nucleoskeleton and Cytoskeleton), que atravessa a membrana dupla [5\u20137]. Nos m\u00fasculos estriados, como o cora\u00e7\u00e3o, o complexo LINC e as suas prote\u00ednas associadas demonstraram ser essenciais para o funcionamento normal [8\u201313]. Associadas ao complexo LINC est\u00e3o as prote\u00ednas que cont\u00eam os dom\u00ednios lamina-associated peptide 2 (Lap2), emerin e MAN1 (LEM), que tamb\u00e9m desempenham um papel importante no cora\u00e7\u00e3o. De facto, as muta\u00e7\u00f5es nos genes Emerin, Lap2 e LEM domain-containing 2 (Lem2) est\u00e3o associadas \u00e0 distrofia muscular de Emery-Dreifuss com perturba\u00e7\u00f5es da condu\u00e7\u00e3o card\u00edaca, \u00e0 cardiomiopatia dilatada e \u00e0 cardiomiopatia arritmog\u00e9nica (CA), respetivamente [14\u201318]. Em particular, uma muta\u00e7\u00e3o de leucina-13 para arginina (L13R) em Lem2 leva a AC e morte s\u00fabita [16,17]. Al\u00e9m disso, uma muta\u00e7\u00e3o no terminal C que altera a serina 479 para fenilalanina (S479F) conduz ao bloqueio do ramo direito e \u00e0 hipertrofia do septo [18].<\/p>\n\n

Pensa-se que o Lem2 desempenha um papel in vitro e em organismos inferiores. Estas v\u00e3o desde a repara\u00e7\u00e3o da NE e a recapagem ap\u00f3s a mitose at\u00e9 \u00e0 manuten\u00e7\u00e3o da forma nuclear, \u00e0 regula\u00e7\u00e3o da heterocromatina e da express\u00e3o gen\u00e9tica e \u00e0 regula\u00e7\u00e3o da sinaliza\u00e7\u00e3o da prote\u00edna quinase activada por mitog\u00e9nio (MAPK) [19\u201327]. Nos ratinhos, a perda global de Lem2 resultou em letalidade embrion\u00e1ria entre E10.5 e E11.5, com um tamanho corporal total significativamente menor e a maioria dos tecidos [28]. Os defeitos de desenvolvimento mais espec\u00edficos inclu\u00edam a diminui\u00e7\u00e3o da neurog\u00e9nese nos tecidos neuronais e paredes mioc\u00e1rdicas mais finas no cora\u00e7\u00e3o. No entanto, o papel espec\u00edfico que o Lem2 desempenha no cora\u00e7\u00e3o ainda n\u00e3o \u00e9 suficientemente conhecido.<\/p>\n\n

Lem2 \u00e9 essencial para o desenvolvimento normal do cora\u00e7\u00e3o<\/h3>\n\n

Para investigar o papel do Lem2 na fun\u00e7\u00e3o card\u00edaca, um estudo recente [1] gerou ratinhos knockout espec\u00edficos para cardiomi\u00f3citos, designados Lem2 cKO, utilizando uma abordagem Cre-LoxP. A abla\u00e7\u00e3o de Lem2 foi confirmada por Western blotting (WB) e an\u00e1lises de imunofluoresc\u00eancia. A maioria dos ratinhos Lem2 cKO n\u00e3o sobreviveu at\u00e9 ao dia embrion\u00e1rio 18.5 (E18.5), indicando letalidade em fases fetais tardias. A bi\u00f3psia de tecido na E18.5 revelou que os cora\u00e7\u00f5es Lem2 cKO eram mais pequenos e tinham \u00e1trios alargados nos quais o sangue se acumulava, indicando uma fun\u00e7\u00e3o card\u00edaca anormal. Para investigar melhor este aspeto, foi efectuada uma microscopia episc\u00f3pica de alta resolu\u00e7\u00e3o (HREM) para a reconstru\u00e7\u00e3o de \u00f3rg\u00e3os em 3D e an\u00e1lises morfol\u00f3gicas [29]. Surpreendentemente, n\u00e3o foram observados defeitos cong\u00e9nitos \u00f3bvios que envolvessem um desenvolvimento ventricular anormal, o que explicava a morte fetal nos ratinhos Lem2 cKO. No entanto, a espessura da parede dos ventr\u00edculos foi ligeiramente reduzida em E14.5, o que foi ainda mais pronunciado em E16.5 e indica um atraso no desenvolvimento. No entanto, n\u00e3o foram detectadas altera\u00e7\u00f5es na organiza\u00e7\u00e3o trabecular, que foi realizada utilizando an\u00e1lises fractais em dados HREM na E16.5 para quantificar a complexidade morfol\u00f3gica.<\/p>\n\n

A abla\u00e7\u00e3o de Lem2 ativa a morte celular e inibe as vias de desenvolvimento card\u00edaco<\/h3>\n\n

Para avaliar melhor as altera\u00e7\u00f5es no desenvolvimento do cora\u00e7\u00e3o, foi realizada uma an\u00e1lise de sequencia\u00e7\u00e3o de ARN na E14.5 em cora\u00e7\u00f5es inteiros de controlo e Lem2 cKO. A express\u00e3o gen\u00e9tica diferencial mostrou altera\u00e7\u00f5es ligeiras mas significativas na express\u00e3o gen\u00e9tica, com 92 e 49 genes a serem significativamente regulados para cima e para baixo, respetivamente (Fig. 1A)<\/strong> [1]. A an\u00e1lise Gene Ontology<\/em> (GO) revelou um enriquecimento significativo da morte celular apopt\u00f3tica e uma redu\u00e7\u00e3o nos processos importantes para o desenvolvimento card\u00edaco adequado, incluindo os envolvidos na morfog\u00e9nese, contra\u00e7\u00e3o e condu\u00e7\u00e3o (Fig. 1B, C e F)<\/strong> [1]. Os genes regulados positivamente incluem Gadd45b e Gadd45g, que est\u00e3o associados \u00e0 morte celular [30,31], bem como Fos, Spp1 e Arrdc3. Os genes regulados negativamente incluem Rnf207, Kcnq1 e Cacng6, que est\u00e3o associados \u00e0 condu\u00e7\u00e3o e contra\u00e7\u00e3o card\u00edacas, e Adamts6, que regula a morfog\u00e9nese card\u00edaca [32\u201335] (Fig. 1G e H)<\/strong> [1]. Estas altera\u00e7\u00f5es foram detectadas tanto ao n\u00edvel do ARNm como das prote\u00ednas (Fig. 1E e H)<\/strong> [1], demonstrando que o Lem2 \u00e9 necess\u00e1rio para a viabilidade celular e essencial para a express\u00e3o gen\u00e9tica normal durante o desenvolvimento do cora\u00e7\u00e3o.<\/p>\n

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\"\"<\/a><\/figure>\n<\/div>\n

A perda de Lem2 leva \u00e0 apoptose dos cardiomi\u00f3citos, \u00e0 acumula\u00e7\u00e3o de danos no ADN e a danos nos micron\u00facleos. <\/h3>\n\n

Para testar se a via de morte celular regulada em alta conduz \u00e0 apoptose, os cora\u00e7\u00f5es foram marcados para a caspase 3 clivada, o que confirmou um elevado n\u00edvel de apoptose nos cora\u00e7\u00f5es Lem2 cKO entre E13.5 e E16.5, consistente com os resultados em tubos neurais de ratinhos Lem2 KO globais [28]. Consequentemente, foi observada uma redu\u00e7\u00e3o de ~41% no n\u00famero de cardiomi\u00f3citos isolados de cora\u00e7\u00f5es E14.5 de cKO em compara\u00e7\u00e3o com os controlos (m\u00e9dia \u00b1 DP: 94 500 \u00b1 25 500 vs. 159 900 \u00b1 34 700 cardiomi\u00f3citos).<\/p>\n\n

Estes resultados foram confirmados por um modelo independente no qual a express\u00e3o de Cre foi conduzida pelo promotor da troponina T card\u00edaca (cTnT) para gerar cora\u00e7\u00f5es Lem2f\/f; cTnT-Cre\/+ cKO [36]. Dado que Lem2 \u00e9 um regulador da sinaliza\u00e7\u00e3o MAPK [28], estas vias foram examinadas e verificou-se que os cora\u00e7\u00f5es Lem2 cKO apresentavam n\u00edveis elevados de ativa\u00e7\u00e3o de ERK1\/2 mas n\u00e3o de p38. Os cora\u00e7\u00f5es Lem2 cKO apresentaram n\u00edveis aumentados de \u03b3H2AX (que marca as quebras de cadeia dupla do ADN) [37] e micron\u00facleos em E14.5 e E16.5.<\/p>\n\n

O desenvolvimento do cora\u00e7\u00e3o \u00e9 estritamente regulado e requer um equil\u00edbrio preciso entre a prolifera\u00e7\u00e3o e a apoptose. Por conseguinte, a colora\u00e7\u00e3o com EdU e anti-fosfo-histona H3 foi utilizada para marcar as c\u00e9lulas em s\u00edntese de ADN e em mitose, respetivamente. As taxas de prolifera\u00e7\u00e3o entre os gen\u00f3tipos eram compar\u00e1veis.<\/p>\n\n

Os n\u00facleos dos cardiomi\u00f3citos que n\u00e3o possuem Lem2 t\u00eam uma forma anormal e s\u00e3o mais suscept\u00edveis \u00e0 rutura mec\u00e2nica<\/h3>\n\n

Depois de se ter observado um aumento da apoptose, dos danos no ADN e dos micron\u00facleos in vivo, os cardiomi\u00f3citos foram colocados em hidrog\u00e9is macios de PDMS a uma press\u00e3o de 6 kPa para imitar a rigidez do cora\u00e7\u00e3o in vivo [38\u201340]. Foi observada uma forma nuclear diferente e uma \u00e1rea nuclear aumentada nos cardiomi\u00f3citos E14.5 Lem2 cKO em compara\u00e7\u00e3o com as c\u00e9lulas de controlo (Fig. 2A-C)<\/strong> [1].<\/p>\n\n

Para avaliar a integridade da NE e observar se ocorre um processo semelhante nos cardiomi\u00f3citos Lem2 cKO, a guanosina monofosfato adenosina monofosfato sintase c\u00edclica (cGAS) cataliticamente inativa, ligada a uma etiqueta fluorescente mScarlet, foi expressa transitoriamente em cardiomi\u00f3citos Lem2 cKO para marcar a exposi\u00e7\u00e3o da cromatina citoplasm\u00e1tica e, por conseguinte, os eventos de rutura nuclear [41,42]. Foi observada uma incid\u00eancia significativamente maior de rutura nuclear nas c\u00e9lulas Lem2 cKO em compara\u00e7\u00e3o com as c\u00e9lulas de controlo, demonstrando um papel importante de Lem2 na manuten\u00e7\u00e3o da integridade nuclear (Fig. 2D) <\/strong>[1]. Foram efectuadas observa\u00e7\u00f5es semelhantes quando as c\u00e9lulas foram colocadas em vidro, que \u00e9 muito mais r\u00edgido do que o hidrogel (Fig. 2B-D)<\/strong> [1]. <\/p>\n

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\"\"<\/a><\/figure>\n<\/div>\n

Foi demonstrado anteriormente que as cGAS est\u00e3o associadas \u00e0 cromatina depois de o NE ter sido colapsado durante a mitose e de o NE n\u00e3o ter sido novamente selado ap\u00f3s a mitose [43-45], o que pode contribuir para as quantidades de cGAS observadas no NE. Para determinar se a acumula\u00e7\u00e3o de cGAS no NE se deve \u00e0 rutura durante a interfase (NERDI) ou a uma selagem defeituosa do NE ap\u00f3s a mitose [46]Foram realizadas imagens de c\u00e9lulas vivas durante a noite em cardiomi\u00f3citos que expressam cGAS e a frequ\u00eancia de acumula\u00e7\u00e3o de cGAS no NE foi monitorizada em cardiomi\u00f3citos que n\u00e3o sofreram mitose. Foram observados valores elevados de NERDI (~8 e ~1%) para Lem2 cKO durante 16 horas em compara\u00e7\u00e3o com os controlos (Fig. 2E)<\/strong> [1]. Como prova adicional de que a acumula\u00e7\u00e3o de cGAS no NE \u00e9 em grande parte o resultado de NERDIs, os cardiomi\u00f3citos foram transduzidos com BAF-GFP como marcador de cicatrizes NERDI [46]. No Lem2 cKO, observou-se um aumento significativo da localiza\u00e7\u00e3o de BAF no NE em compara\u00e7\u00e3o com o controlo, o que faz lembrar os dados do cGAS. Em conson\u00e2ncia com este facto, foi observada uma concord\u00e2ncia de quase 100% da localiza\u00e7\u00e3o de BAF com cGAS em focos NE.<\/p>\n\n

A inibi\u00e7\u00e3o da contra\u00e7\u00e3o muscular enfraquece os defeitos de forma e as rupturas dos n\u00facleos<\/h3>\n\n

Uma vez que os n\u00facleos dos cardiomi\u00f3citos est\u00e3o sujeitos a um stress mec\u00e2nico constante atrav\u00e9s do complexo LINC, que transmite a for\u00e7a dos sarc\u00f3meros para o esqueleto nuclear, os cardiomi\u00f3citos foram tratados com para-nitroblebistatina, que inibe a miosina e p\u00e1ra a contra\u00e7\u00e3o muscular [47]. Este agente foi capaz de atenuar completamente os defeitos do molde nuclear e as rupturas (Fig. 2F-J)<\/strong> [1].<\/p>\n\n

Uma vez que a para-nitroblebistatina \u00e9 um inibidor geral da fam\u00edlia da miosina de classe II, a contra\u00e7\u00e3o muscular foi especificamente inibida por um mecanismo diferente, utilizando o verapamil, um f\u00e1rmaco clinicamente utilizado que inibe os canais de c\u00e1lcio dependentes da voltagem para afetar o acoplamento excita\u00e7\u00e3o-contra\u00e7\u00e3o. Da mesma forma, o verapamil tamb\u00e9m foi capaz de salvar completamente as formas aberrantes e as fissuras nos n\u00facleos dos cardiomi\u00f3citos (Fig. 2F-J)<\/strong> [1] [48,49]. Para testar ainda se a integridade dos n\u00facleos \u00e9 afetada pela contra\u00e7\u00e3o muscular, foi utilizado um ativador da miosina card\u00edaca (Omecamtiv mecarbil) para estimular a contra\u00e7\u00e3o muscular. Ap\u00f3s estimula\u00e7\u00e3o da contra\u00e7\u00e3o muscular, observou-se um aumento da rutura nuclear nos n\u00facleos Lem2 cKO (Fig. 2G, H, J)<\/strong> [1]. De facto, foi detectado um aumento dos danos no ADN nos cardiomi\u00f3citos cKO em compara\u00e7\u00e3o com os controlos, o que pode ser revertido atrav\u00e9s da inibi\u00e7\u00e3o da contra\u00e7\u00e3o muscular (Fig. 2K)<\/strong> [1]. Estes resultados indicam que o Lem2 nos cardiomi\u00f3citos \u00e9 essencial para a manuten\u00e7\u00e3o da NE e da integridade do genoma sob o stress mec\u00e2nico causado pelas for\u00e7as de contra\u00e7\u00e3o muscular. No entanto, an\u00e1lises detalhadas de WB e imunofluoresc\u00eancia n\u00e3o mostraram diferen\u00e7as detect\u00e1veis na maioria das prote\u00ednas NE e da l\u00e2mina entre os gen\u00f3tipos.<\/p>\n\n

N\u00e3o se observam defeitos \u00f3bvios na fun\u00e7\u00e3o card\u00edaca dos ratinhos Lem2-iCKO<\/h3>\n\n

Ap\u00f3s a descoberta de que o Lem2 \u00e9 essencial nos cardiomi\u00f3citos fetais, surgiu a quest\u00e3o de saber se tamb\u00e9m desempenha um papel semelhante nos adultos. Por conseguinte, ap\u00f3s ter sido detectada a express\u00e3o de Lem2 em cardiomi\u00f3citos adultos utilizando c\u00e9lulas isoladas e fatias de cora\u00e7\u00e3o (Fig. 3A e B) <\/strong>[1], foram gerados ratinhos Lem2 inducible conditional knockout (iCKO) utilizando uma linha de ratinho Cre espec\u00edfica para cardiomi\u00f3citos induzida por tamoxifeno Tnnt2MerCreMer\/+ [50].<\/p>\n

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\"\"<\/a><\/figure>\n<\/div>\n

Foram efectuadas ecocardiografias \u00e0s oito semanas de idade e antes da abla\u00e7\u00e3o de Lem2 \u00e0s nove semanas de idade, seguidas de ecocardiografias seriadas \u00e0s 33, 48 e 83 semanas de idade. A fun\u00e7\u00e3o card\u00edaca e a espessura da parede dos ratinhos Lem2 iCKO eram compar\u00e1veis \u00e0s dos ratinhos de controlo em todas as medi\u00e7\u00f5es e em todas as idades (Fig. 3C-E)<\/strong> [1]. N\u00e3o foram observadas altera\u00e7\u00f5es nos n\u00edveis de express\u00e3o do programa gen\u00e9tico fetal e dos marcadores pr\u00f3-fibr\u00f3ticos por an\u00e1lise quantitativa de RT-PCR, indicando que n\u00e3o houve remodela\u00e7\u00e3o adversa ou fibrose. <\/p>\n\n

Para al\u00e9m das an\u00e1lises ecocardiogr\u00e1ficas e de express\u00e3o g\u00e9nica, a an\u00e1lise histol\u00f3gica n\u00e3o revelou evid\u00eancia de defeitos morfol\u00f3gicos, altera\u00e7\u00f5es na deposi\u00e7\u00e3o de matriz extracelular ou altera\u00e7\u00f5es no tamanho dos mi\u00f3citos (Fig. 3F)<\/strong> [1]. Al\u00e9m disso, tamb\u00e9m n\u00e3o se verificaram altera\u00e7\u00f5es na rela\u00e7\u00e3o entre o peso do cora\u00e7\u00e3o e o comprimento das costelas e entre o peso do cora\u00e7\u00e3o e o peso corporal nos ratinhos Lem2 iCKO, em compara\u00e7\u00e3o com os ratinhos de controlo. Estes dados sugerem que a remo\u00e7\u00e3o do Lem2 n\u00e3o afecta a fun\u00e7\u00e3o card\u00edaca at\u00e9 \u00e0s 83 semanas de idade, quando o cora\u00e7\u00e3o do rato adulto est\u00e1 completamente desenvolvido.<\/p>\n\n

A maioria dos n\u00edveis de prote\u00edna NE n\u00e3o \u00e9 alterada nos cora\u00e7\u00f5es Lem2 iCKO e nos cardiomi\u00f3citos isolados<\/h3>\n\n

Dada a aus\u00eancia de fen\u00f3tipo b\u00e1sico nos ratinhos Lem2 iCKO, colocou-se a hip\u00f3tese de outras prote\u00ednas NE poderem compensar a Lem2, tal como demonstrado anteriormente noutros sistemas [51,52]. Para testar isto, foram realizados WBs em cora\u00e7\u00f5es inteiros de ratinhos controlo e Lem2 iCKO e analisados para uma gama de prote\u00ednas NE e da l\u00e2mina (Fig. 3G) <\/strong>[1]. Como esperado, a concentra\u00e7\u00e3o de Lem2 em Lem2 iCKO foi reduzida para 46% da concentra\u00e7\u00e3o de controlo. As outras prote\u00ednas n\u00e3o sofreram altera\u00e7\u00f5es, com exce\u00e7\u00e3o da prote\u00edna SUN2 do complexo LINC, que aumentou 1,5 vezes em compara\u00e7\u00e3o com o controlo (p<0,01).<\/p>\n\n

Os n\u00edveis de imunofluoresc\u00eancia e a localiza\u00e7\u00e3o da maioria das prote\u00ednas NE n\u00e3o foram alterados, com exce\u00e7\u00e3o da Lem2, que foi significativamente reduzida nos cardiomi\u00f3citos iCKO, e um ligeiro aumento da SUN2, o que foi consistente com os WBs. Os n\u00edveis de transcri\u00e7\u00e3o do ARNm de Sun2 (bem como de outros componentes do complexo LINC) foram semelhantes entre os gen\u00f3tipos, sugerindo que o aumento de SUN2 observado nos cardiomi\u00f3citos Lem2 iCKO \u00e9 provavelmente regulado a n\u00edvel proteico e n\u00e3o a n\u00edvel da express\u00e3o gen\u00e9tica.<\/p>\n\n

A integridade nuclear e a rigidez n\u00e3o s\u00e3o afectadas nos cardiomi\u00f3citos adultos Lem2 iCKO<\/h3>\n\n

An\u00e1lises abrangentes 2D e 3D dos n\u00facleos dos cardiomi\u00f3citos n\u00e3o revelaram diferen\u00e7as nos par\u00e2metros de forma entre os gen\u00f3tipos. Curiosamente, no entanto, foram observadas invagina\u00e7\u00f5es da NE\/lamina tanto nos controlos como nos ratinhos iCKO, mas numa extens\u00e3o semelhante em ambos os gen\u00f3tipos.<\/p>\n\n

Trabalhos anteriores mostraram que as muta\u00e7\u00f5es nos parceiros de intera\u00e7\u00e3o de Lem2, as laminas A e C, influenciam a rigidez do n\u00facleo e tornam os n\u00facleos mais deform\u00e1veis sob tens\u00e3o mec\u00e2nica [4]. Para testar se este \u00e9 tamb\u00e9m o caso com Lem2 iCKO, foi realizada nanoindenta\u00e7\u00e3o em cardiomi\u00f3citos adultos de Lem2 iCKO e de ratinhos de controlo. O m\u00f3dulo de elasticidade calculado mostrou rigidezes do n\u00facleo compar\u00e1veis entre Lem2 iCKO e os ratos de controlo (1,01 e 1,26 kPa, respetivamente). O Lem2 n\u00e3o \u00e9, portanto, necess\u00e1rio para a morfologia e mec\u00e2nica nucleares normais nos cardiomi\u00f3citos de ratos adultos.<\/p>\n\n

A forma nuclear \u00e9 mantida em resposta ao aumento da press\u00e3o nos cardiomi\u00f3citos adultos Lem2 iCKO<\/h3>\n\n

Dada a aus\u00eancia de fen\u00f3tipo b\u00e1sico nos cardiomi\u00f3citos Lem2 iCKO, os n\u00facleos foram em seguida submetidos a stress em cardiomi\u00f3citos Lem2 iCKO vivos. Para este efeito, foram isolados cardiomi\u00f3citos adultos de Lem2 iCKO ou de controlos de companheiros de ninhada e expostos a press\u00f5es hidrodin\u00e2micas. Estes correspondiam aos observados em cora\u00e7\u00f5es saud\u00e1veis, normais ou pressurizados in vivo, utilizando um estimulador de press\u00e3o (CellScale MechanoCulture TR; modificado para uma gama de press\u00e3o baixa [53]) [54].<\/p>\n\n

Cardiomi\u00f3citos adultos de Lem2 iCKO e controlos de estimula\u00e7\u00e3o oscilat\u00f3ria foram submetidos a press\u00e3o normal (120\/15 mmHg) ou alta (200\/30 mmHg) e foram realizadas an\u00e1lises da forma nuclear. Curiosamente, os n\u00facleos dos cardiomi\u00f3citos de ambos os gen\u00f3tipos responderam de forma semelhante \u00e0 press\u00e3o elevada e tornaram-se mais irregulares e menos circulares, conforme medido pela circularidade, firmeza e rela\u00e7\u00e3o de aspeto dos n\u00facleos. No entanto, n\u00e3o foram observadas altera\u00e7\u00f5es na forma nuclear entre as c\u00e9lulas Lem2 iCKO e as c\u00e9lulas de controlo. <\/p>\n\n

Nos cardiomi\u00f3citos adultos que se adaptaram \u00e0s exig\u00eancias f\u00edsicas da NE, a remo\u00e7\u00e3o de Lem2 parece n\u00e3o ter qualquer efeito na fun\u00e7\u00e3o card\u00edaca ou na forma nuclear. Lem2 n\u00e3o \u00e9 necess\u00e1rio para manter a forma nuclear sob alta press\u00e3o em cardiomi\u00f3citos adultos. No entanto, n\u00e3o se pode excluir que o Lem2 remanescente nos cora\u00e7\u00f5es Lem2 iCKO seja suficiente para manter a fun\u00e7\u00e3o do Lem2 neste papel.<\/p>\n\n

Uma vis\u00e3o da cardiomiopatia das muta\u00e7\u00f5es do Lem2 e da cardiomiopatia deLaminopatias<\/h3>\n\n

Os resultados do estudo sugerem que o Lem2 \u00e9 crucial para a integridade do NE em desenvolvimento no cora\u00e7\u00e3o fetal e protege o n\u00facleo das for\u00e7as mec\u00e2nicas da contra\u00e7\u00e3o muscular. Em contraste, o cora\u00e7\u00e3o adulto n\u00e3o \u00e9 afetado de forma detet\u00e1vel pela deple\u00e7\u00e3o parcial de Lem2, possivelmente devido a uma NE melhor estabelecida e a uma maior adapta\u00e7\u00e3o ao stress mec\u00e2nico. Estes dados fornecem informa\u00e7\u00f5es sobre os mecanismos subjacentes \u00e0 cardiomiopatia em doentes com muta\u00e7\u00f5es Lem2 e cardio-laminopatias.<\/p>\n\n

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    CARDIOVASC 2024; 23(1): 22-26<\/em><\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"

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