Les dernières avancées dans le domaine de l’hématologie ont été au centre de la réunion annuelle de l’ Association européenne d’hématologie qui s’est tenue cette année à Madrid. Les experts ont discuté des données de recherche sur différentes maladies du sang, des organes hématopoïétiques, ainsi que des ganglions lymphatiques et du système lymphatique.
La vitamine C (VitC) est un cofacteur de l’important régulateur épigénétique TET2. Cependant, les patients atteints d’un cancer hématologique souffrent souvent d’une carence en vitamine C. Les modifications épigénétiques acquises sont une caractéristique des tumeurs malignes myéloïdes, et les mutations de perte de TET2 sont une cause fréquente de leucémogénèse. Par conséquent, une supplémentation en VitC pourrait constituer une stratégie thérapeutique attrayante pour les patients atteints de tumeurs malignes myéloïdes et de maladies précurseurs à un stade précoce. Il convient donc d’étudier si une supplémentation orale en VitC est sûre et peut modifier les caractéristiques et les résultats moléculaires et cliniques de la maladie chez les patients atteints de tumeurs malignes myéloïdes à faible risque – c’est-à-dire les néoplasmes myélodysplasiques à faible risque (MDS ; score IPSS-R ≤3) et les MDS/néoplasmes myéloprolifératifs (MDS/MPN) – et de la maladie précurseur, la cytopénie clonale d’importance indéterminée (CCUS) [1]. Le critère d’évaluation principal de l’étude de phase II randomisée et contrôlée par placebo était la modification de la fréquence allélique des mutations somatiques dans les cellules mononucléées de la moelle osseuse entre la valeur initiale et la fin du traitement.
Entre 2017 et 2022, dans quatre centres, 55 patients ont été randomisés dans le groupe vitC et 54 dans le groupe placebo. Au début de l’étude, la concentration de VitC dans le plasma sanguin périphérique était insuffisante (<50 μmol/L) chez 57% des participants à l’étude. Une augmentation significative de la concentration plasmatique médiane de VitC a été observée dans le groupe VitC, passant de 45,85 μmol/L au début de l’étude à 81,90 μmol/L après 12 mois, alors qu’aucun changement statistiquement significatif de la concentration de VitC n’a été observé dans le groupe placebo. Un total de 31 EIG a été observé chez 15 des 55 patients (27%) du groupe vitC, et 57 EIG chez 23 des 54 patients (43%) du groupe placebo. A la fin de l’étude, la durée médiane de suivi était de 33,5 mois (intervalle 0-70,0 mois) et 35 décès étaient survenus (groupe vitC, n=11 ; groupe placebo, n=24). L’OS médian n’a pas été atteint dans le groupe vitC et était de 42,2 mois dans le groupe placebo. Même dans l’analyse multivariable, le traitement oral vitC est resté statistiquement associé à une OS plus longue par rapport au placebo.
Augmentation de l’hémoglobine due à la NFKB1
Les Tibétains, les Éthiopiens et les Andins ont fait l’objet d’études approfondies sur leurs adaptations génétiques évolutives au manque d’oxygène en haute altitude. En haute altitude, les Tibétains et les Éthiopiens ont un taux d’hémoglobine (Hb) comparable à celui observé au niveau de la mer, tandis que les Andes ont un taux d’Hb plus élevé que les Européens vivant à la même altitude. Il a déjà été établi que la sélection tibétaine de deux variantes génétiques dans les gènes du facteur inductible par l’hypoxie (HIF), EPAS1 (HIF-2a) et EGLN1 (prolylhydroxylase 2), est corrélée à leur plus faible taux d’Hb (Science 2010, Nat Gen 2014). Une étude antérieure de séquençage du génome entier a identifié de forts signaux de sélection dans les gènes BRINP3, NOS2 et TBX5, qui étaient liés à la fonction et au développement cardiovasculaires, mais ne pouvaient pas expliquer un taux d’Hb plus élevé. Une analyse du transcriptome devrait maintenant permettre d’identifier des signatures génétiques pour des taux d’Hb élevés chez les Aymaras [2].
Un total de 2601 gènes exprimés différemment et 1922 gènes épissés ont été identifiés chez les aymaras, qui ont été associés à des voies de signalisation liées à l’immunité, l’inflammation et l’hypoxie. Leurs régulateurs cis-génétiques ont été étudiés sous la forme de caractéristiques quantitatives d’expression et de caractéristiques quantitatives d’épissage (sQTLs). De nouveaux transcrits avec l’exon 4 ou 5 basculé ou les deux exons ont été trouvés dans NFKB1 (AS-NFKB1), une partie clé de la voie de signalisation NF-kB qui contribue à la suppression de la voie inflammatoire et à l’activation des HIF. L’AS-NFKB1 sans exon 4 ou les exons 4 et 5 ne sont pas convertis en protéines, tandis que l’AS-NFKB1 avec l’exon 5 incliné est converti en protéines, mais est converti de manière inappropriée en p50 et n’est pas capable de se transloquer correctement dans le noyau cellulaire. Les transcrits AS-NFKB1 entraînent donc une perte partielle de la fonction canonique de NFKB1 en tant que suppresseur de NF-kB. Ces transcrits AS-NFKB1 ont été associés à 5 sQTL et étaient enrichis chez les Aymaras par rapport à d’autres populations. Parmi ces 5 sQTL, rs230511 était le polymorphisme mononucléotidique (SNP) le plus fréquemment sélectionné chez les Aymaras. Les niveaux de transcrit AS-NFKB1 et l’allèle T (allèle enrichi en aymara) de rs230511 ont été corrélés positivement avec des niveaux élevés d’Hb en aymara. Ils étaient également corrélés aux niveaux de transcrits et de protéines des gènes inflammatoires régulés par NF-kB, tels que l’interféron gamma et l’interleukine 6. Alors qu’une inflammation accrue supprime l’érythropoïèse en régulant à la hausse l’hepcidine, qui était également corrélée aux niveaux de transcrits de l’AS-NFKB1, il a également été constaté que l’AS-NFKB1 était corrélée à une régulation à la hausse significative de nombreux gènes régulés par HIF. Les HIF sont les principaux régulateurs de l’érythropoïèse accrue qui, dans leur ensemble, expliquent l’érythrocytose des Aymaras. Ces résultats suggèrent que l’augmentation de l’activité transcriptionnelle des HIF, qui conduit à l’érythrocytose aymara, surmonte la suppression de l’érythropoïèse par une inflammation accrue modulée par l’AS-NFKB1.
Dynamique du protéome dans les HSZ
La description des moteurs cellulaires et externes de l’auto-renouvellement des cellules souches hématopoïétiques (CSH) est essentielle pour améliorer l’expansion des CSH ex vivo et pour mieux comprendre la biologie des cellules leucémiques. Des mutations de perte de fonction dans le régulateur épigénétique TET2 sont souvent observées dans les néoplasies myéloprolifératives (NMP). On pense qu’elles confèrent aux HSZ un potentiel d’auto-renouvellement accru, ce qui entraîne une croissance clonale des cellules mutées. Au niveau transcriptionnel, les mutations Tet2 sont associées à une altération de l’expression des gènes dans les CSH de souris. Cependant, jusqu’à présent, relativement peu de gènes responsables de l’apparition et de la progression du MPN ont été identifiés et les approches transcriptomiques n’ont eu qu’un succès limité dans l’identification de nouvelles cibles thérapeutiques. Bien que de nombreux outils aient été développés pour étudier le génome et le transcriptome avec une résolution de cellule unique, le faible nombre de HSZ dans les tissus murins et humains a jusqu’à présent empêché une caractérisation globale du protéome cellulaire et extracellulaire des HSZ. Des progrès parallèles dans l’expansion des HSZ ex vivo et la protéomique à faible entrée nous amènent au seuil d’une rupture de cette barrière vieille de plusieurs décennies et d’une extension considérable de notre compréhension des facteurs d’autorenouvellement dans l’hématopoïèse normale et maligne.
L’objectif était de réaliser un profilage protéomique de CSH normales et déficientes en Tet2 fraîchement isolées ou expansées ex vivo et de caractériser les facteurs solubles dans le microenvironnement des cellules in vivo et en culture, afin d’établir une carte moléculaire complète des facteurs d’autorenouvellement intra- et extracellulaires dans les CSH normales et prémalignes [3].
Des protocoles de préparation d’échantillons miniaturisés et multiplexés ont été utilisés en combinaison avec la protéomique quantitative basée sur la spectrométrie de masse pour comparer les CSH normales et déficientes en Tet2, ainsi que la SM d’acquisition indépendante des données (DIA) pour caractériser l’environnement extracellulaire des CSH normales et prémalignes in vivo et pendant l’expansion ex vivo. Il a été démontré que les protéomes cellulaires et sécrétés stratifient avec précision les CSH sur la base de leur puissance fonctionnelle et de leur statut mutationnel, et identifient de nouveaux composants moléculaires qui ne sont pas détectés par les analyses transcriptomiques. Du côté de la pré-leucémie, il a été observé que les CSH déficientes en Tet2 présentent une altération de l’expression des protéines de la matrice extracellulaire (MEC) et que l’interaction avec ces protéines dans des niches artificielles affecte la fonction cellulaire. Les analyses protéomiques extracellulaires montrent en outre que les cellules déficientes en Tet2 créent un microenvironnement qui est pro-inflammatoire et pro-thrombotique, même chez les animaux jeunes et asymptomatiques. Dans les tests d’expansion des CSH, la protéomique identifie la nécessité de voies de réparation de l’ADN intactes en tant que composants clés des clones de CSH qui sont capables d’un auto-renouvellement complet par rapport aux cultures d’expansion infructueuses. En accord avec cela, les analyses fonctionnelles montrent que l’enzyme de réparation de l’ADN Parp1 et la m6A déméthylase Fto jouent un rôle clé dans l’expansion ex vivo des CSH. L’analyse du sécrétome des cultures infructueuses montre en outre que les protéines mastocytaires prédisent l’échec de l’expansion des CSE transplantables, tandis que l’analyse du sécrétome des clones qui peuvent être transplantés in vivo à long terme indique une concentration élevée d’hémoglobine comme indicateur de réussite de la culture.
Mutations TP53 dans la LLC
Les mutations somatiques de TP53 sont fréquentes dans les cancers et favorisent la progression de la maladie et la résistance au traitement. Dans la leucémie lymphoïde chronique (LLC), le TP53 muté entraîne une mauvaise réponse et une survie plus courte. La signification pronostique des différentes mutations, de la taille du clone et de l’apparition simultanée d’autres modifications génétiques sous différents traitements n’est toutefois pas claire. L’objectif d’une étude était donc de décrire le paysage des mutations TP53 dans la LLC et d’examiner leur signification pronostique dans les essais cliniques, en tenant compte des facteurs de risque génétiques et du type de traitement [4].
1 824 mutations TP53 ont été identifiées chez 1 368 patients, dont 336 dans la cohorte d’efficacité. Les mutations TP53 étaient des variants mononucléotidiques (78%), des délétions (12%), des mutations de site d’épissage (6%) et autres 4%. Les patients mutés TP53 présentaient un (77%), deux (15%) ou plusieurs variants (8%). U-IGHV était prédominant dans 78% des cas mutés TP53, del(17p) dans 51%. Avec une durée médiane d’observation de 65,7 mois, les patients mutés TP53 de la cohorte d’efficacité avaient une PFS et un OS inférieurs à ceux des patients sauvages. Ces effets défavorables ont été observés pour les variants à l’intérieur et à l’extérieur du domaine de liaison à l’ADN. Les mutations de gain/perte de fonction, les mutations de site d’épissage ou de non-sens et les mutations missense avec prédiction pathogène étaient toutes associées à une survie plus courte. En revanche, les variants Missense de signification inconnue et les mutations entraînant une activité partielle de p53 n’ont pas aggravé le pronostic par rapport au type sauvage de TP53. Les mutations mineures de TP53 (part allélique du variant <10%) étaient associées à un OS plus court, mais pas à une PFS plus courte, ce qui laisse supposer une influence sur le traitement ultérieur.
Congrès: European Hematology Association (EHA)
Littérature :
- Mikkelsen SU, et al : VITAMIN C SUPPLEMENTATION IN PATIENTS WITH CLONAL CYTOPENIA OF UNDETERMINED SIGNIFICANCE OR LOW-RISK MYELOID MALIGNANCIES : RESULTATS FROM EVI-2, A RANDOMIZED, PLACEBO-CONTROLLED PHASE 2 STUDY. Abstract LB3444, European Hematology Association (EHA), 13-16.06.2024 Madrid.
- Song J, et al : ELEVATED HEMOGLOBIN OF ANDEAN AYMARAS IS CAUSED BY ALTERNATIVELY SPLICED NFKB1. Abstract LB3441, European Hematology Association (EHA), 13-16.06.2024 Madrid.
- Yassinskaja M , et al : INTRA- AND EXTRACELLULAR PROTEOME DYNAMICS DURING NORMAL AND MALIGNANT HEMATOPOIETIC STEM CELL EXPANSION. Abstract LB3443, European Hematology Association (EHA), 13-16.06.2024 Madrid.
- Bertossi C, et al : LE LANDSCAPE DES MUTATIONS TP53 ET LEUR PROGNOSTIC IMPACT DANS LA LEUKEMIE LYMPHOCYTIQUE CHRONIQUE. Abstract S101, European Hematology Association (EHA), 13-16.06.2024 Madrid.
InFo ONKOLOGIE & HÄMATOLOGIE 2024; 12(4): 28–29
