Metodi non invasivi basati sul laser nella diagnostica di routine

Con la tomografia a coerenza ottica e la microscopia a scansione laser confocale, sono disponibili metodi high-tech all’avanguardia per la diagnosi non invasiva del cancro della pelle non melanocitico e del melanoma. Entrambi i metodi sono indolori per i pazienti e un altro vantaggio è che i dati e i risultati vengono forniti in tempo reale. Le tecnologie basate sul laser che possono essere utilizzate in dermatologia sono in continuo sviluppo, un esempio è la tomografia a coerenza ottica “confocale a campo linea”.

Quanto più precocemente viene individuato il cancro della pelle, tanto maggiori sono le possibilità di guarigione. Nella diagnostica, i metodi non invasivi sono sempre più utilizzati in aggiunta all’ispezione clinica e alla dermoscopia. Questo riduce in modo significativo l’impegno dell’esame per la diagnosi delle alterazioni cutanee sospette. I moderni metodi non invasivi che consentono una valutazione complessiva delle lesioni mediante l’imaging ottico sezionale includono la microscopia laser confocale e la tomografia a coerenza ottica.

Microscopia a scansione laser confocale: metodo in vivo ed ex vivo

La microscopia a scansione laser confocale (Fig. 1) può essere utilizzata per esaminare in modo affidabile e indolore le cellule della pelle sotto la superficie cutanea, alla ricerca di cambiamenti maligni [1]. In questo modo, i pazienti ricevono la diagnosi attualmente più rapida e affidabile del cancro della pelle e dei suoi precursori. Nella letteratura inglese, la microscopia a scansione laser confocale è chiamata “Reflectance Confocal Microscopy”. Per quanto riguarda la diagnosi dei carcinomi basali, in uno studio multicentrico è stata dimostrata una sensibilità del 100% e una specificità dell’88,5% per la microscopia laser confocale [2]. Le linee guida aggiornate al 2020 sul melanoma maligno fanno riferimento a una recente meta-analisi sulla microscopia laser confocale nella valutazione dei tumori cutanei maligni [3,4]. In 8 dei 21 studi, sono stati analizzati solo i melanomi. È stato possibile valutare un numero totale di 1400 lesioni. La sensibilità in questi studi è stata del 92,7% [95% CI: 90-95] e la specificità del 78,3% [95% CI: 76-81] [3]. Per la microscopia laser confocale, si utilizzano dispositivi con uno o più laser come sorgente luminosa, che possono essere impiegati per l’esame della pelle sia in vivo che ex vivo [2]. La Dr. med. Daniela Hartmann, della LMU di Monaco, ha riferito sullo spettro di indicazioni della microscopia confocale a scansione laser ex vivo per l’istologia al letto del paziente, in occasione del congresso sui tumori della pelle dell’Arbeitsgemeinschaft Dermatologische Onkologie (ADO) [5]. Mentre la microscopia a scansione laser in vivo può essere utilizzata per prelevare biopsie ottiche non invasive di lesioni cutanee, il metodo ex vivo è un esame a fluorescenza diretto-intraoperatorio ultra-veloce del tessuto appena escisso, ha spiegato il dottor Hartmann. A seconda del dispositivo, sono disponibili almeno due lunghezze d’onda laser, oltre a diversi coloranti fluorescenti. Le sezioni ottiche verticali, come noto dall’istologia, vengono prodotte in 2-3 minuti. Un’innovazione importante per la pratica quotidiana è la colorazione HE digitale(riquadro). Attualmente esistono numerosi studi sull’uso della microscopia confocale a scansione laser ex vivo nella chirurgia Mohs. In particolare, nel caso dei carcinomi basocellulari, si è potuto confermare che la microscopia a scansione laser è innanzitutto significativamente più veloce e che, grazie alla fluorescenza dei nuclei cellulari del carcinoma basocellulare, le parti del tumore sono più facili da individuare.

Microscopia a scansione laser confocale (ex-vivo) con colorazione digitale HE

L’elaborazione digitale a colori delle immagini, introdotta di recente, imita quasi perfettamente la colorazione convenzionale di ematossilina-eosina (HE) ed è molto adatta per diagnosticare i carcinomi basocellulari e i loro margini di incisione in condizioni di routine [9]. Questo metodo rappresenta quindi un’alternativa salva-tessuti all’incisione rapida con il criostato. Si prevede che ulteriori sviluppi, come i vetrini con fissazioni magnetiche per ottimizzare la pressione di contatto, miglioreranno ulteriormente l’accuratezza dei risultati.

Tomografia a coerenza ottica

La tomografia a coerenza ottica (OCT) è una procedura di imaging che utilizza i laser per illuminare tutti gli strati della pelle umana. La base della tomografia a coerenza ottica è l’interferometria a luce bianca. In questo processo, il tempo di transito di un segnale all’interno del campione di tessuto viene confrontato con un segnale di riferimento di lunghezza del percorso ottico nota. Il metodo di esame consente una profondità di penetrazione fino a un millimetro e una risoluzione di 15 µm. Oltre alla diagnosi precoce dei tumori cutanei e all’evitamento di biopsie non necessarie, secondo il Dr. med. Sandra Schuh, Ospedale Universitario di Augusta, il supporto nella selezione della terapia (chirurgia vs. trattamento topico) e il monitoraggio della terapia sono tra le principali aree di applicazione della tomografia a coerenza ottica nella diagnostica di routine [5]. Per quanto riguarda il rilevamento del carcinoma basocellulare, l’uso dell’OCT aumenta l’accuratezza rispetto alla diagnosi clinica e dermoscopica, come dimostrato in uno studio su 164 pazienti e 235 lesioni: la specificità potrebbe essere aumentata dal 29% al 75% utilizzando l’OCT [6]. Secondo la linea guida attuale, la tomografia a coerenza ottica è adatta a misurare lo spessore dei carcinomi basocellulari fino a uno spessore di circa 1 mm e consente una stima preoperatoria dell’estensione di un carcinoma basocellulare visualizzando i bordi laterali [7].

OCT confocale a campo lineare: nuovo metodo non invasivo

La tomografia a coerenza ottica confocale in campo linea è un metodo innovativo che consente la risoluzione cellulare e la profondità di penetrazione nel derma profondo, in modo da poter determinare non solo la morfologia ma anche la profondità di invasione di numerosi tumori [10]. Grazie a questa tecnologia laser, è possibile ottenere immagini 3D della pelle in tempo reale. Per la diagnosi di BCC, l’OCT confocale a campo linea è un ottimo dispositivo, afferma Cristel Ruini, MD, LMU di Monaco [5]. Il primo studio importante che descrive i criteri morfologici relativi alla diagnosi e alla classificazione dei sottotipi di BCC è stato pubblicato nel 2020 su JEADV da Suppa et al. pubblicato [11].

Sono disponibili anche diversi studi sull’OCT per la valutazione delle lesioni melanocitarie, in cui vengono descritti i potenziali criteri di differenziazione. In uno studio prospettico multicentrico su un sistema HD-OCT, sono state esaminate in totale 93 lesioni (27 delle quali erano melanomi) [8]. È stata raggiunta una sensibilità del 74,1% [95% CI: 54-89] e una specificità del 92,4% [95% CI: 83-98] [3].

Congresso: Congresso tedesco sul cancro della pelle 2021

Letteratura:

Ahlgrimm-SiessV, et al: Microscopia confocale nel cancro della pelle. Curr Derm Rep 2018; 7: 105-118.
Linea guida S1: Microscopia laser confocale in dermatologia, 2017, Numero di registro AWMF: 013/076, www.awmf.org/uploads/tx_szleitlinien/013-076l_S1_Konfokale_Lasermikroskopie_der_Haut_2017-08.pdf, (ultimo accesso 23.11.2021).
Linea guida S3 sulla diagnosi, il trattamento e il follow-up del melanoma, 2020, numero di registro AWMF: 032/024O, www.awmf.org/uploads/tx_szleitlinien/032-024OLl_S3_Melanom-Diagnostik-Therapie-Nachsorge_2020-08.pdf (ultimo accesso 23.11.2021).
Xiong YD, et al: Una meta-analisi della microscopia confocale a riflettanza per la diagnosi dei tumori cutanei maligni. J Eur Acad Dermatol Venereol 2016; 30(8): 1295-1302.
“Diagnostica per immagini e fisica del cancro della pelle – dal nuovo mondo”, WS4, 31° Congresso tedesco sul cancro della pelle, 07.09.2021
Ulrich M, et al: La sensibilità e la specificità della tomografia a coerenza ottica per la diagnosi assistita del carcinoma basocellulare non pigmentato: uno studio osservazionale. Br J Dermatol 2015; 173(2): 428-435.
Linea guida S2k: Carcinoma basocellulare della pelle, numero di registro AWMF: 032-021, www.awmf.org/uploads/tx_szleitlinien/032-021l_S2k_Basalzellkarzinom-der-Haut_2018-09_01.pdf, (ultimo recupero 23.11.2021)
Gambichler T, et al: Uno studio pilota multicentrico che esamina la tomografia a coerenza ottica ad alta definizione nella differenziazione del melanoma cutaneo e dei naevi melanocitici. J Eur Acad Dermatol Venereol 2015; 29(3): 537-541.
Grupp M, et al.: Controllo dei margini sezionali dei carcinomi basocellulari mediante microscopia confocale a scansione laser ex-vivo con elaborazione digitale dei colori – applicazione nella diagnostica di routine. J Dtsch Dermatol Ges 2021; 19(5): 685-693.
Ruini C, Sattler E: OCT confocale a campo linea: il cuscino che depone le uova? Dermatologia attuale 2020; 46(04): 148-151.
Suppa M, et al: Tomografia a coerenza ottica confocale in campo linea del carcinoma basocellulare: uno studio descrittivo. J Eur Acad Dermatol Venereol 2021; 35(5): 1099-1110.