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  • Ematologia e oncologia

L’approccio unico è storia, la medicina personalizzata è il futuro.

  • Senza categoria
  • 4 minute read

La ricerca dell’individualità è stata al centro del Congresso di Oncologia ed Ematologia di quest’anno in Svizzera. Questo cambiamento di paradigma è destinato a cambiare la vita dei pazienti e a ridefinire il trattamento del cancro. I progressi della genomica, della biologia molecolare e dell’analisi dei dati possono essere utilizzati per adattare i trattamenti ai profili genetici e molecolari unici del tumore di ogni paziente.

I concentrati di piastrine sono fondamentali per il trattamento della trombocitopenia grave, che è particolarmente comune in onco-ematologia. Attualmente, le piastrine sono ottenute esclusivamente da donazioni di sangue, ma la loro breve durata di conservazione (5-7 giorni) porta a significative carenze di approvvigionamento, soprattutto durante le crisi sanitarie o i periodi di vacanza. Per superare queste limitazioni, è stato sviluppato un metodo per ottenere le piastrine da una linea cellulare megacariocitaria geneticamente modificata, derivata da cellule ematopoietiche CD34+ adulte, utilizzando un bioreattore rotante modificato [1]. Le cellule ematopoietiche CD34+ sono state isolate dal sangue periferico mobilizzato con G-CSF di donatori adulti. Queste cellule sono state trasdotte con oltre 40 diverse combinazioni di geni guidate dalla doxiciclina. Le cellule sono state coltivate in terreni privi di siero per l’espansione e differenziate in megacariociti (MK) in assenza di doxiciclina. I megacariociti derivati sono stati analizzati mediante citometria a flusso per i principali marcatori di superficie, tra cui GPIIIa, GPIIb, GPIb e GPVI. Le cellule CD34+ trasdotte con membri specifici della famiglia di geni homeobox hanno mostrato una vitalità di coltura a lungo termine (fino a 4 mesi) e un potenziale di differenziazione megacariocitica. I megacariociti generati dalla massa cellulare hanno espresso i marcatori GPIIIa+GPIb+ e GPVI+GPIIb+ e sono poliploidi. Le particelle similpiastriniche generate nel bioreattore HemostOD erano intatte e funzionali e hanno mostrato l’espressione GPIIIa+GPIb+CalceinAM+ e il legame con il fibrinogeno dopo l’attivazione con convulcina o trombina.

Terapia cellulare CAR-T per l’AML

Lo sviluppo della terapia con cellule T chimeriche con recettore dell’antigene (CAR) per l’AML ha incontrato finora delle difficoltà. Recentemente, il CD70 è emerso come un bersaglio interessante grazie alla sua espressione differenziale nell’ematopoiesi maligna e normale, al suo ruolo evidente nella biologia dell’AML e al suo convincente profilo di sicurezza. Di conseguenza, è stato adottato un approccio razionale per generare nuovi CAR CD70 con una maggiore efficacia contro la LAM [2]. Per determinare la composizione ottimale della struttura CAR, il dominio extracellulare del ligando naturale CD27 è stato accoppiato con diverse cerniere, transmembrana (TM) ed endodomini e codificato in un vettore lentivirale di terza generazione. Per ottimizzare l’interfaccia di legame CD27-CD70, sono stati eseguiti calcoli di progettazione proteica con algoritmi fisici e basati sul deep learning. Le cellule CAR-T prodotte con un protocollo compatibile con le buone prassi di produzione sono state analizzate per la citotossicità in un saggio di uccisione sequenziale in co-coltura con cellule AML CD70+ MOLM-13.GFP-ffLuc. L’attività anti-leucemica in vivo è stata valutata in uno xenotrapianto MOLM-13.GFP-ffLuc o in un modello di xenotrapianto derivato da pazienti CD70low. Uno screening off-target del candidato finale è stato eseguito utilizzando la tecnologia Retrogenix Cell Microarray.

Dei quattro gruppi CAR testati, uno ha mostrato una robusta uccisione delle cellule AML con una produzione di IFNγ e IL-2 significativamente più elevata in vitro. A dosi non curative, il costrutto ha soppresso fortemente la crescita della leucemia e ha migliorato la sopravvivenza globale dei topi in vivo. Un totale di 32 varianti modulate per affinità con interfaccia di legame ottimizzata sono state selezionate da progetti computazionali e testate funzionalmente. Sono state identificate due varianti con un’efficacia migliore rispetto al costrutto parentale, accompagnate dalla persistenza a lungo termine di cellule CAR-T funzionali. Uno screening off-target della variante più efficace contro 6500 proteine umane non ha mostrato interazioni off-target. I dati dimostrano che è possibile integrare la progettazione computazionale delle proteine nello sviluppo dei CAR per identificare candidati efficaci e selezionare meglio le molecole per la traduzione clinica.

Pazienti anziani con linfoma non-Hodgkin

Poiché i pazienti vivono più a lungo, il fenomeno dell’invecchiamento rappresenta una sfida importante nel trattamento del cancro. Ciò è particolarmente vero per i pazienti con linfoma non-Hodgkin (NHL), dove l’età media alla diagnosi è di circa 70 anni. Uno studio ha analizzato gli esiti dei pazienti anziani trattati per il NHL in clinica [3]. È emerso che è possibile ottenere un profilo di tossicità favorevole nei pazienti anziani trattati per NHL, adattando l’intensità del trattamento. Tale aggiustamento consente più linee di trattamento indipendentemente dall’età, ma in base al punteggio CIRS-G.

Congresso: 7° Congresso svizzero di oncologia ed ematologia (SOHC)

Letteratura:

  1. Humbert M, et al: Generazione di piastrine funzionali da una linea cellulare megacariocitaria ingegnerizzata derivata da cellule ematopoietiche CD34+ adulte mediante un bioreattore a letto rotante modificato. Abstract 377.7° Congresso Svizzero di Oncologia ed Ematologia (SOHC), 20-22 novembre 2024.
  2. Que T, et al: Cellule CAR-T CD70 con interfaccia di legame CD27: CD70 progettata computazionalmente per la leucemia mieloide acuta. Abstract 442.7° Congresso Svizzero di Oncologia ed Ematologia (SOHC), 20-22 novembre 2024.
  3. Nasrinfar K, et al: I pazienti anziani con linfoma non-Hodgkin ricevono altrettante linee di trattamento rispetto a quelli più giovani grazie all’adattamento, in un contesto di vita reale. Abstract 395.7° Congresso Svizzero di Oncologia ed Ematologia (SOHC), 20-22 novembre 2024.

InFo ONKOLOGIE & HÄMATOLOGIE 2024; 12(6): 20 (pubblicato il 11.12.24, prima della stampa)

Autoren
  • Leoni Burggraf
Publikation
  • InFo ONKOLOGIE & HÄMATOLOGIE
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