Como é que a terapia sistémica influencia a disbiose?

Um dos objectivos do estudo observacional multicêntrico ProRaD é compreender melhor os mecanismos que influenciam o curso da dermatite atópica (DA). Num subprojecto, os investigadores utilizaram tecnologias modernas de sequenciação para investigar os efeitos da terapêutica do sistema no microbioma da pele em doentes com DA. Espera-se que projectos de investigação como este optimizem as estratégias de tratamento da doença de Alzheimer.

Nos últimos anos, a investigação do microbioma (do grego mikrós “pequeno” e bios “vida”) tem-se tornado cada vez mais interessante e os métodos de análise molecular das populações microbianas estão constantemente a ser desenvolvidos [1]. Atualmente, a sequenciação de nova geração (NGS) é frequentemente utilizada como método de medição em análises do microbioma [1]. O NGS pode ser utilizado para determinar a identidade de bactérias, fungos e outros microrganismos numa amostra sob a forma de segmentos do genoma e para estimar as frequências relativas com que estão representados na amostra [2]. Foi efectuada uma investigação intensiva e sistemática sobre o microbioma cutâneo e intestinal humano utilizando NGS, por exemplo, como parte do “Human Microbiome Project”, uma iniciativa dos Institutos Nacionais de Saúde dos EUA [3]. Entretanto, o NGS tem sido utilizado em numerosos estudos para investigar o microbioma e, entre outras coisas, foram obtidos conhecimentos interessantes sobre o microbioma da pele na dermatite atópica (DA) [4]. Particularmente durante um ataque agudo de DA, pode ser observada uma diversidade bacteriana muito reduzida da microbiota e uma elevada abundância relativa de Staphylococcus aureus (S. aureus) [5].

Análises do microbioma no âmbito do coletivo ProRaD

A fim de investigar o efeito da terapêutica local e sistémica no microbioma da pele humana em doentes com DA, foram recolhidas e analisadas amostras de pele no âmbito do estudo longitudinal prospetivo ProRaD em Augsburgo e Bona entre 2017 e 2019 [6].

Métodos: Os investigadores analisaram e avaliaram um total de 1077 esfregaços do microbioma da pele e dados sobre o tratamento medicamentoso de 462 indivíduos testados num estudo transversal. O microbioma da pele dos doentes foi registado utilizando a sequenciação do amplicon 16S rRNA da região V1-V3**. [1,6]O algoritmo “AnnotIEM” foi utilizado para a análise bioinformática, que compara a sequência de ARN das bactérias com numerosas bases de dados, permitindo a determinação subsequente do microbioma individual até ao nível bacteriano específico com elevada precisão .

** A composição do microbiota pode ser determinada através da sequenciação das regiões variáveis (V1-V9) do rDNA 16S bacteriano. www.gtl.hhu.de/verfuegbare-workflows-proben request/next-generation-sequencing/microbiome-profiling-16s-amplicon sequencing

O atual regime de tratamento da DA foi documentado e os doentes foram classificados em grupos de tratamento de acordo com as recomendações das directrizes EuroGuiDerm [6].

Resultados da análise: Foi confirmada uma forte correlação entre a condição da pele e a frequência de S. aureus em lesões cutâneas de doentes com DA. Não foi encontrada qualquer correlação entre a abundância relativa de S. aureus e a idade ou o sexo. A fim de excluir a condição da pele como fator de confusão, foram realizadas análises separadas do microbioma da pele para os cursos ligeiro, moderado e grave da doença. Em doentes com DA moderada, verificou-se uma abundância relativa significativamente menor de S. aureus nos que receberam terapia sistémica em comparação com os que receberam apenas tratamento tópico. Além disso, os doentes com DA tratados com medicamentos sistémicos tendem a diferir em função do agente sistémico administrado. Verificou-se que a abundância relativa média de S. aureus era inferior nos participantes que recebiam terapêutica com o dupilumab biológico (bDMARD) em comparação com os participantes que recebiam terapêutica sistémica com imunossupressores convencionais (csDMARD).

Conclusão : Este estudo piloto descreveu possíveis associações entre o tratamento da DA e as alterações do microbioma na coorte ProRaD. Os resultados demonstram a relevância de processos imunológicos específicos na interação microbiana na DA e apontam para as implicações associadas ao tratamento terapêutico do sistema. Em particular, houve indicações de que o tratamento com dupilumab tem um efeito favorável na disbiose associada à DA.

O microbioma também se normalizou com o dupilumab no estudo TREATgermany

Hartmann et al. relataram um estudo publicado na revista “Allergy” em 2023, que investigou a forma como o microbioma da pele na DA é influenciado por várias terapias sistémicas [7].

Metodologia: Para a sua análise, os investigadores utilizaram um conjunto de dados do estudo de registo TREATgermany. Os esfregaços de pele de 157 doentes com DA foram analisados por sequenciação do amplicon 16S rRNA antes e depois de três meses de tratamento com dupilumab ou ciclosporina e comparados com 258 controlos saudáveis de base populacional. [15]A gravidade da doença foi avaliada utilizando instrumentos estabelecidos, como o “Eczema Area and Severity Index” (EASI).

Resultados da análise: Este estudo também confirmou uma elevada abundância relativa de S. aureus correlacionada com a gravidade da DA (EASI). O tratamento com dupilumab levou a uma mudança na colonização microbiana para um padrão semelhante ao observado em controlos saudáveis. No decurso do tratamento, a frequência relativa de Staphylococcus e especialmente de S. aureus diminuiu significativamente na pele lesionada e não lesionada da DA, enquanto a frequência de Staphylococcus hominis aumentou. Estas alterações foram largamente independentes do grau de melhoria clínica e não foram observadas durante o tratamento com ciclosporina.

Conclusão : Nas presentes análises, o tratamento sistémico com dupilumab tendeu a normalizar o microbioma da pele na DA, em contraste com a ciclosporina. Verificou-se que este facto era largamente independente da resposta clínica, sugerindo que o bloqueio do recetor alfa da IL-4 induzido pelo dupilumab per se pode ter um efeito no microbioma, afirmaram os autores do estudo. No entanto, são necessários mais estudos empíricos para saber mais sobre este assunto [7].

Hipóteses sobre os mecanismos subjacentes

De acordo com Hartmann et al. o bloqueio das citocinas de tipo 2 pode ter efeitos directos e/ou indirectos na composição do microbioma da pele [7]. [8–10] [11,12]Os efeitos directos dizem respeito à função de barreira da pele e incluem, por exemplo, uma normalização da composição lipídica epidérmica, um aumento do teor de péptidos hidratantes naturais e o aumento da produção de péptidos antimicrobianos, acompanhados por uma redução da absorção de S. aureus ou uma tendência para o aumento da eliminação de S. aureus. No entanto, a configuração experimental descrita na análise do conjunto de dados TREATgermany não permite tirar conclusões claras sobre as interacções directas, segundo Hartmann et al. Por conseguinte, não é claro se as alterações na composição do microbioma observadas com o dupilumab são uma consequência dos efeitos directos específicos do medicamento e/ou dos efeitos indirectos da redução da inflamação cutânea. >Os doentes com uma resposta EASI90 apresentaram a recuperação mais pronunciada da diversidade bacteriana, que era comparável à dos controlos saudáveis, exceto no que diz respeito a uma assinatura microbiana residual caracterizada pela presença de apenas algumas variantes de sequência de amplicons (ASV) associadas à DA em frequências variáveis.

Congresso: Reunião Anual da ADF

Literatura:

CK-CARE, Centro de Investigação e Educação em Alergia, Relatório Anual 2019, https://ck-care.ch/wp-content/uploads/2021/09/CKC_Jahresbericht_2019_web.pdf,(último acesso em 17 de maio de 2024)
“Mikrobiomanalyse unter Berücksichtigung biologischer Datenstruktur”, https://opendata.uni-halle.de/bitstream/1981185920/64498/1/antweiler_ Kai-Lars_Dissertation_2021.pdf, (último acesso em 17 de maio de 2024)
Human Microbiome Project Consortium: Estrutura, função e diversidade do microbioma humano saudável. Nature 2012; 486(7402): 207-214.
Wollina U: Microbioma em dermatite atópica. Clin Cosmet Investig Dermatol 2017; 10: 51-56.
Fölster-Holst R: O papel do microbioma da pele na dermatite atópica – correlações e consequências. Jornal da Sociedade Dermatológica Alemã 2022; 20(5): 571-578.
Rohayem R, et al: Targeted systemic treatment modulates the relative abundance of staphylococcus aureus in patients with atopic dermatitis, P119. 50th Annual Meeting of the Arbeitsgemeinschaft Dermatologische Forschung (ADF). Exp Dermatol 2024; 33(3): e14994.
Hartmann J; Grupo de estudo TREATgermany. O tratamento com dupilumab, mas não com ciclosporina, altera o microbioma para uma flora cutânea saudável em doentes com dermatite atópica moderada a grave. Allergy 2023; 78(8): 2290-2300.
Rohner MH, et al: Dupilumab reduz a inflamação e restaura a barreira cutânea em pacientes com dermatite atópica. Allergy 2021; 76: 1268-1270.
Miyake R, et al: A absorção de Staphylococcus aureus pelos queratinócitos é reduzida pela via interferão-fibronectina e pela expressão de filagrina. J Dermatol 2022; 49: 1148-1157.
Hönzke S, et al: Influência das citocinas Th2 no envelope cornificado, proteínas de junção apertada e β-defensinas em equivalentes de pele com deficiência de filagrina. J Invest Dermatol 2016; 136: 631-639.
Möbus L, et al: A dermatite atópica apresenta assinaturas estáveis e dinâmicas do transcriptoma da pele. J Allergy Clin Immunol 2021; 147: 213-223.
Ferraro A, et al: Role and plasticity of Th1 and Th17 responses in immunity to Staphylococcus aureus. Hum Vaccin Immunother. 2019; 15: 2980-2992.
Moskovicz V, Gross A, Mizrahi B: Extrinsic Factors Shaping the Skin Microbiome (Factores extrínsecos que moldam o microbioma da pele). Microorganisms 2020, 8, 1023. www.mdpi.com/2076-2607/8/7/1023#,(último acesso em 17.05.2024)
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